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目的:研究金线莲多糖(ARP)最佳提取工艺及对环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法:1.以金线莲粉末为原材料,采用水提的方法,选取浸提温度、浸提时间、料液比三个因素作为考察因素,以粗多糖提取率作为评价标准,采用正交试验设计优化ARP的提取工艺;2.150只昆明雄性小鼠适应性饲养1周后,随机分为5组,分别为空白对照组、模型组及ARP低、中、高剂量组,每组30只;第1～3d,除空白对照组注射生理盐水外,其他各组腹腔注射环磷酰胺(80mg/kg),连续3d,建立小鼠免疫抑制模型;第4～10d,空白组和模型组灌服蒸馏水,其他组分别灌服1OOmg/kg、200mg/kg、400mg/kg的ARP。末次给药24h后,称量小鼠体重及胸腺、脾脏的重量,计算小鼠免疫器官指数;采用碳粒廓清试验检测巨噬细胞的吞噬功能;MTT法测定多糖对免疫抑制小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响;全自动血液生化分析仪检测白细胞总数;ELISA法检测小鼠血清中细胞因子的含量;荧光定量PCR技术检测小鼠脾脏中细胞因子及转录因子的表达情况;流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞百分比,以及CD4+/CD8+的比值。结果:1.ARP提取的最佳条件为:浸提温度90℃,浸提时间4h,料液比1:20,在此条件下金线莲粗多糖得率为28.69%;2.与模型组相比,ARP高剂量组小鼠的体重增量增加(P<0.05);ARP组脾脏指数降低(P<0.05),胸腺指数升高(P<0.05);ARP低、中剂量组吞噬指数增加(P<0.05);ARP高剂量组T淋巴细胞增殖刺激指数(SI)增加(P<0.05);ARP高剂量组小鼠白细胞总数降低(P<0.05);ARP低、高剂量组小鼠血清中IL-2含量增加(P<0.05),高剂量组IL-6含量增加(P<0.05);ARP高剂量组小鼠IL-4mRNA相对表达量降低(P<0.05),中、高剂量组IL-6、IFN-γ相对表达量降低(P<0.05);ARP组小鼠转录因子T-bet的相对表达量降低(P<0.05),高剂量组GATA3的相对表达量升高(P<0.05);ARP组CD4+、CD8+T淋巴细胞百分比升高(P<0.05),CD4+/CD8+降低(P<0.05)。结论:上述研究结果表明,金线莲多糖能够缓解Cy引起的免疫抑制小鼠生长缓慢、纠正Cy引起的脾脏的肿大以及胸腺的萎缩、增强巨噬细胞的吞噬功能、刺激T淋巴细胞的增殖、调控细胞因子的表达与分泌等,在一定程度上提高Cy引起的免疫抑制小鼠的免疫功能,并且与调节T淋巴细胞的分化有关。