【摘 要】
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目的探讨人退变终板软骨(cartilage endplate,CEP)中凋亡和沉默信息调节因子2同源物1(silent information regulation 2homolog-1,SIRT1)的表达情况,探讨SIRT1是否可以抑制退
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目的探讨人退变终板软骨(cartilage endplate,CEP)中凋亡和沉默信息调节因子2同源物1(silent information regulation 2homolog-1,SIRT1)的表达情况,探讨SIRT1是否可以抑制退变CEP细胞的凋亡。方法CEP取材于重庆医科大学附属第一医院腰椎间盘突出(lumbar disc herniation,LDH)和腰椎骨折(lumbar vertebrae fracture,LVF)的手术患者(时间从2014年6月到2015年5月),用Pfirrmann分级评价人椎间盘退变程度。HE染色观察正常和退变CEP的细胞形态和细胞数量,免疫组织化学观察正常和退变CEP中SIRT1,caspase3,Ⅱ型胶原的表达。单层培养CEP细胞,取p2代CEP细胞完成实验。细胞经过白藜芦醇和SIRT1干扰RNA或尼克酰胺处理后,westernblot检测SIRT1、Bcl-2和caspase3的表达,流式细胞学检测细胞凋亡率。结果HE染色结果表明终板组织细胞为类圆形软骨细胞类型,退变CEP细胞数量减少。免疫组织化学结果显示,退变CEP中SIRT1和Ⅱ型胶原的表达下降,凋亡相关因子caspase-3的表达上升。白藜芦醇处理CEP细胞后SIRT1和Bcl2的表达上升,凋亡相关蛋白caspase-3的蛋白表达下降,细胞凋亡率下降;经SIRT1干扰RNA或尼克酰胺处理后SIRT1和Bcl2的表达下降,caspase3表达上升,细胞凋亡率上升。结论CEP的退变与细胞凋亡有关,退变CEP细胞凋亡增加;SIRT1可以抑制退变CEP细胞的凋亡。
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