【摘 要】
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肺癌的发病率和死亡率位居全球癌症的榜首。肺癌的传统治疗方法有手术治疗、放疗和化疗,其中,化疗是肺癌常用的治疗方法。阿霉素（DOX）作为一种常用的化疗试剂被广泛应用,能够抑制核酸的合成。氯尼达明（LND）能抑制细胞内ATP的合成,也是一种化疗增敏剂。细胞外囊泡（EVs）是细胞分泌的纳米级别的膜泡,作为化疗药物载体具有稳定性高、生物相容性好、免疫原性低等优势。肿瘤细胞分泌的EVs能够靶向特定的肿瘤组织
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肺癌的发病率和死亡率位居全球癌症的榜首。肺癌的传统治疗方法有手术治疗、放疗和化疗,其中,化疗是肺癌常用的治疗方法。阿霉素（DOX）作为一种常用的化疗试剂被广泛应用,能够抑制核酸的合成。氯尼达明（LND）能抑制细胞内ATP的合成,也是一种化疗增敏剂。细胞外囊泡（EVs）是细胞分泌的纳米级别的膜泡,作为化疗药物载体具有稳定性高、生物相容性好、免疫原性低等优势。肿瘤细胞分泌的EVs能够靶向特定的肿瘤组织,在抗肿瘤领域有良好的应用前景。本研究从肺癌细胞提取不同粒径的细胞外囊泡,联合负载DOX和LND,显著增强体外抗肿瘤效应,大幅减少了化疗药物的用量。本文主要研究内容与结果总结如下:1、细胞外囊泡的提取:将细胞培养上清液分别用120000 g和16000 g的离心力离心,得到EVs 120k、EVs 16k,与DOX和LND共孵育得到载药囊泡。2、细胞对EVs的摄取过程:细胞通过膜融合的方式摄取EVs,在细胞外囊泡与细胞共孵育1 h后即发生了摄取,而在共孵育36 h后摄取基本达到饱和。3、EVs联合载药的体外抗癌效应:用细胞外囊泡作为药物载体,用DOX联合化疗增敏剂LND,能够逐级放大化疗药物的抗肿瘤作用,显著减少DOX的用量。4、协同抗癌机理的探讨:游离DOX仅有11%被细胞摄取,而用细胞外囊泡包裹的药物较游离药物能更多地被细胞摄取,DOX/EVs 120k、DOX/EVs 16k中阿霉素的摄取率则分别为79%和84%,从而导致抗肿瘤效果的增加。另一方面,药物通过影响ATP的合成、对DNA造成损伤及增加ROS的产生抑制肿瘤细胞的生长。两种药物通过不同的作用机理起到协同放大抗肿瘤效应。
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