白腐菌木质纤维素降解次序研究

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木质纤维素是自然界中一种最重要的可再生资源,但目前仍未被充分利用,其主要障碍在于木质素难于降解和转化;白腐菌是目前发现的对木质素降解最有潜力的微生物之一。本课题通过测定6株侧耳属白腐菌在不同基质上的生长状况和酶活分泌的能力,从中筛选出具有生长优势和强漆酶分泌能力的菌株BP2,与黄胞原毛平革菌(CD0)和杂色云芝(CD1)两株模式菌相比,菌株具有好的生长优势、强的酶系分泌能力和降解的优势。评价纤维素、半纤维素和木质素三者含量测定方法结果表明,采用改进的差重法或Van Soest法进行重量分析,对于评价白腐菌降解木质纤维素的过程是可行的。发酵基质的含量分析结果表明:在玉米秸秆、稻草秸秆和木屑基质中,菌株BP2对木质素和半纤维素具有很好的降解优势和一定的选择性;在培养50天期间,降解木质素的相对速率分别为33.9%、53.2%和43.5%,选择性分别为0.20、0.26和0.49;降解半纤维素的相对速率分别为32.1%、57.1%和35.9%,选择性分别为0.44、0.45和0.19;对纤维素降解的始终较少,但随着木质化程度的升高,其降解的程度增大。菌株CD1与菌株BP2有相似的降解优势和选择性。菌株CD0在木屑基质上降解很差,在其他两种基质上的降解选择性与菌株BP2也相似。利用FTIR、电镜检测降解过程中木质纤维素化学结构和表观结构的变化表明,菌株BP2对木质纤维素的降解是氧化裂解过程。木质素相关谱峰(1630、1510、1325和1265cm-1)的相对强度,半纤维素和纤维素相关谱峰(1462 、1160、1053和898 cm-1)的相对强度,以及与羰基、羟基、羧基等的相对强度,这些谱峰相对强度的变化表明:菌株BP2对木质素降解的相对较明显,对纤维素和半纤维素降解的相对较少,木质化程度越高,相关波峰的相对强度变化表现的越明显,优先降解半纤维素的现象越明显,降解木质素的程度越大;菌株BP2对半纤维素、木质素和纤维素等大分子进行氧化降解,大分子的环状结构首先被氧化裂<WP=5>解成小分子片断(如木素单体等)、小分子酸类物质(如乳酸、葡萄糖酸等)、小分子酯类物质(如葡萄糖酯类等)等而被利用。经菌株CD1和CD0降解后的相关发酵样品的波谱变化与菌株BP2相似。电镜图片分析的结果表明,菌株BP2首先降解包裹在纤维素外围的半纤维素和木质素,使木质纤维素基质纤维化。基质中漆酶分泌规律的研究表明,木质素的降解与漆酶没有正相关性。综合重量法、FTIR和电镜等分析的结果可知,菌株BP2首先利用基质中小分子碳源(可溶性糖等)和降解半纤维素,然后降解半纤维素和木质素,之后才同时降解纤维素、半纤维素和木质素,对半纤维素和木质素具有很好的降解优势和一定的选择性。菌株CD0和CD1也具有相似的降解规律。菌株BP2分别降解提纯的半纤维素、纤维素和木质素以及混合基质的结果表明,BP2在纯基质上生长和降解效果较差,小分子碳源对它影响很大;菌株BP2能直接利用、降解半纤维素和纤维素,优先降解半纤维素,不能直接利用和降解木质素,从另外一个角度佐证了菌株BP2对木质纤维素的降解次序。本论文首次通过重量分析、FTIR分析和电镜三者结合,分析了菌株BP2对木质纤维素基质降解的特性和次序,为实现木质纤维素资源的充分利用提供依据,具有一定的理论和应用意义。
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