嗜热四膜虫中Chromodomain蛋白Tcd3和Tcd4的表达调控与功能分析

来源 :山西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YX19781987
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Chromodomain (chromatin organization modifier domain)是一个由30~50个氨基酸组成的保守的蛋白质结构域,含有Chromodomain的蛋白质广泛存在于多种生物中的染色质结合蛋白中,通过与组蛋白或RNA的作用参与了异染色质的形成及基因的表达调控。四膜虫中程序性全基因组重排在有性生殖过程中发生,siRNA, MeH3K9, Pdd1p和Pdd3p参与这一过程,然而其详细机制仍不清楚。本研究从四膜虫基因组中筛选到两个含有Chromodomain的基因TCD3(Tetrahymena Chromo Domain 3)与TCD4(Tetrahymena Chromo Domain 4),对这两个基因的表达调控和细胞定位进行了研究,获得的主要结果如下:1.TCD3和TCD4序列分析通过生物信息学的方法,从四膜虫大核基因数据库鉴定了TCD3 (TTHERM00585180)和TCD4 (TTHERM00585190),两个基因串联于同一条大核染色体上,间隔237bp,两个基因内均具有GT-AG的内含子。TCD3和TCD4基因拟编码的蛋白334个和344个氨基酸残基组成,分子量分别为40.26kDa和41.11kDa,等电点(pI)分别为4.590和5.435。全基因表达Microarray分析表明TCD3和TCD4在四膜虫营养生殖阶段和饥饿期不表达,在有性生殖过程中8h时表达量最高,并且两者的表达谱一致。2.TCD3和TCD4的5’和3’-RACE TCD3和TCD4的ORF分别为1005bp和1035bp,大核染色体中基因全长分别为1241bp和1429bp,各含有两个内含子。5’RACE和3’RACE表明TCD3和TCD4的5’端非编码区(5’-UTR)长度分别为40bp和43bp,3’端非编码区(3’-UTR)长度分别为90bp和189bp。Chromodomain聚类分析表明Tcd3和Tcd4与pddlp蛋白的Chromodomain最为相似,SWISS—MODEL预测发现Tcd4的Chromodomain缺失α-螺旋结构。3.Tcd3和Tcd4的免疫荧光定位构建含有HA标签的表达载体OE-PBX-TCD3和OE-PBX-TCD4,转化四膜虫CU428和B2086细胞株,通过巴龙霉素筛选,PCR鉴定,获得HA-Tcd3和HA-Tcd4的过表达细胞株。激光共聚焦显微镜对HA-Tcd3和HA-Tcd4的免疫荧光定位发现:HA-Tcd3定位于四膜虫有性生殖核发育的亲本大核和新发育的大核中;HA-Tcd4则定位于conjusome和新发育的大核中。TCD3和TCD4相似的序列特征,保守的Chromodomain位置,一致的表达谱,表明两个基因中的一个很可能源于基因复制,进而加强该基因的功能。TCD3和TCD4在四膜虫接合生殖时期特异表达,都能够定位于新的发育的大核中,表明Tcd3和Tcd4极有可能参与了新的大核发育过程中程序性基因组重排。Tcd3和Tcd4在亲本大核和conjusome特异的定位,以及不同的模型结构,暗示基因TCD3和TCD4在进化过程中产生了新的功能。这些研究为进一步探讨chromodomain蛋白的功能提供了新的数据。
其他文献
初级视觉皮层是哺乳动物视觉系统处理视觉信息的必经区域,几乎所有的视觉信息都要经过初级视觉皮层进行初步整合后再经过高层进一步认知。神经系统各个网络之间以及网络内部
统编初中语文教材"1+X"立体式阅读学习体系,对语文学科核心素养的落实起到了推动的作用,但关于"X"的建构并没有明确的方法指导,这对一线教师的课程建构能力提出了新的要求。
【正】 关于商品总价格与总价值的关系,目前学术界在讨论中已有的意见,比较倾向于两者可以自然形成一致的看法。但对于两者因何、如何一致,则有不同的意见。一种意见认为:价
本文概述了视频监控系统通用功能模型及电信级视频监控系统结构,重点讨论了电信级中心服务平台架构,最后介绍了一种电信级ViSS智能视频监控系统平台的解决方案。
【正】 实学同志在《如何在扩大再生产的图式中反映劳动生产率提高的影响》(见《江汉学报》1962年第4期)一文中,提出了一个问题,即如何“依据马克思的一般理论,把劳动生产率
在西方历史长河中,从古罗马时代的Seneca和Cicero到工业革命时期的Adam.Smith和David.Hume,感戴已经得到了西方哲学家们的广泛讨论,成为哲学家解释人类运作和社会生活的基石
本文我们主要讨论了与模的Ding同调维数相关的几个问题.首先,我们用推广的完全投射(内射)分解刻画了模的Ding同调维数,讨论了广义Ding投射(内射)模与具有有限Ding投射(内射)
目的分析硝酸盐类联合恬尔心治疗心绞痛的临床护理效果。方法选择我院2012年1月至2012年12月收治的108例新绞痛患者为研究对象,将其随机分成观察组和对照组,每组54例,两组患者君
空气污染问题作为全球热点问题,受到越来越多人的关注。相对其他国家的空气质量来说,中国的空气污染程度较为严重,对人们健康造成一定威胁,且在十九大报告会议上,习近平总书
语言和文字密不可分,汉字是汉语的载体。在德国,已经有一定数量的高中学生开始学习汉语,汉字学习成为德国汉语教学中师生必须攻克的问题。教材是教师安排汉字教学内容的主要依据,也是学生学习汉字的重要材料,但目前德国高中汉语综合教材中汉字教学部分的编写还存在一定的问题,影响学生的汉字学习。因此有必要探讨符合德国实际的汉语综合教材中汉字教学部分的编写问题,以便更好地促进学生的汉字学习。本文的研究内容包括以下部