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仿刺参(Apostichopus Japonicus)是一种重要的海洋物种,主要分布在太平洋的东西两岸及印度洋中。海参商业品种的育苗工作开始于20世纪80年代,日本、中国、印度等国家先后取得成功。由于其含有丰富的黏多糖和蛋白质等,且具有营养价值和药用价值高等特点,因此在山东和辽宁等地很快成为一种重要的养殖品种。本研究采用甲醇浸提和凝胶过滤层析的方法,以仿刺参肠道为材料来提取抗菌肽,并采用滤纸片扩散法和MTT法测定其体外抗菌活性及体外抗肿瘤活性。其中,抗菌活性实验对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌、枯草杆菌、溶壁微球菌、迟钝爱德华菌、鳗弧菌8种常见菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration, MIC)进行了测试。另外,通过SDS-PAGE和高效液相色谱(HPLC)的方法对仿刺参抗菌肽的组成进行了进一步的分析。对仿刺参抗菌肽粗提物进行凝胶过滤层析分离后,得到了3个不同的组分,分别命名为A1、A2、A3,活性实验发现仿刺参抗菌肽A3具有显著地抑菌活性和抑肿瘤活性。MIC结果显示,仿刺参抗菌肽A3对溶壁微球菌、副溶血弧菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、哈维氏弧菌、迟钝爱德华菌、鳗弧菌、枯草杆菌的最小抑菌浓度分别为0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.0mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml、2.0mg/ml、2.0mg/ml、4.0mg/ml。同时发现仿刺参抗菌肽A3对肺癌A549细胞的增殖具有一定的抑制效果。SDS-PAGE电泳显示仿刺参抗菌肽A3的分子量为6.5kD左右,HPLC结果可以看出仿刺参抗菌肽A3有四个不同的组分构成。本实验对仿刺参抗菌肽的功能进行了研究,发现了仿刺参抗菌肽A3对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有明显的抗菌活性,对肺癌A549细胞增殖的抑制作用呈明显的剂量依赖关系。这一研究可能对抗菌及抗肿瘤新药的研发具有一定的意义,近年来,抗生素被人们大量使用,由此带来了细菌耐药性问题,为了解决这一问题,我们可以考虑使用仿刺参抗菌肽来取代抗生素。海参养殖业近年来快速发展,但是快速发展和管理落后使各种病害问题也日益严重,因此我们从海参肠道内提取到抗菌肽,可以将其应用于水产养殖中,以应对各种病害。