论文部分内容阅读
目的:观察蛋白激酶C抑制剂N苯甲酰星孢菌素(N-benzoyl-staurosporine,PKC412)对膀胱癌细胞T24生长、增殖和侵袭能力的抑制作用及其对细胞周期的影响。
方法:体外培养膀胱癌细胞T24,加入不同浓度的PKC412(0.01μM、0.1μM、1μM、10μM)分别培育一定的时间(24h、48h、72h),软琼脂克隆形成试验测定PKC412对T24细胞克隆形成的抑制作用,MTT比色试验测定PKC412对T24细胞存活和生长的抑制作用,Transwell小室法检测PKC412对T24细胞侵袭能力的抑制作用,流式细胞术周期测定法分析T24经PKC412处理48小时后细胞周期的变化。
结果:软琼脂克隆形成试验观察到0.01μM PKC412对T24细胞克隆形成无抑制作用,自0.1μM~10μM,PKC412对T24细胞克隆形成抑制率逐渐上升,从5.46%~80.46%(P<0.05),呈时间和剂量依赖性,差异有统计学意义。MTT试验观察到自0.01μM~10μM,PKC412对T24细胞存活和生长抑制作用逐渐增强,从1.17%~73.62%(P<0.05),呈时间和剂量依赖性,差异有统计学意义。流式细胞术结果显示T24细胞经0.01μM~10μMPKC412作用48小时后,G0/G1期细胞比例逐渐下降,分别为70.22%、62.40%、41.08%和38.23%;而G2/M期细胞比例逐渐升高,分别为12.26%,17.71%,52.92%和58.41%,出现G2/M期细胞阻滞。Transwell小室法观察到PKC412作用24小时对T24细胞透膜能力无抑制作用,作用48h、72h后,自0.01μM~10μM,对T24细胞透膜抑制率逐渐增加,从12.06%~73.72% (P<0.05),呈时间和剂量依赖性,差异有统计学意义。
结论:
1、PKC412能够通过G2/M期细胞阻滞抑制T24细胞体外生长、增殖和克隆形成能力,呈时间和剂量依赖关系。
2、PKC412能够抑制T24细胞的体外侵袭能力,呈时间和剂量依赖关系。