【摘 要】
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目的:优选生地黄不同部位提取纯化工艺参数,并筛选不同部位止血作用最佳配比,为生地黄汤的进一步开发利用奠定基础。 方法:(1)采用中心组合实验设计-响应面法分析优选生地黄提取
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目的:优选生地黄不同部位提取纯化工艺参数,并筛选不同部位止血作用最佳配比,为生地黄汤的进一步开发利用奠定基础。 方法:(1)采用中心组合实验设计-响应面法分析优选生地黄提取工艺,以加水倍量、提取时间、煎煮次数为自变量,梓醇含量及多糖含量的加和为因变量,对自变量各自水平进行多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取最佳工艺,并进行预测分析;(2)以梓醇含量为评价指标,采用大孔树脂纯化方法,确定总环烯醚萜苷的纯化工艺条件及参数;以多糖含量为评价指标,采用不同方法除蛋白,确定多糖精制的纯化工艺方法及参数;(3)分别采用薄层色谱法、高效液相色谱法对生地黄中环烯醚萜苷进行定性定量分析,并通过检查干燥失重、炽灼残渣等项目控制其质量;采用紫外分光光度计法对生地黄多糖进行定量分析,并通过检查干燥失重、炽灼残渣等项目控制其质量;(4)采用组分配伍法对生地黄总环烯醚萜苷及多糖提取物进行配比,用剪尾法和毛细玻管法测定出、凝血时间,比较各组分不同配伍比例的止血作用。 结果:(1)以梓醇与多糖含量进行综合加权,优选出生地黄有效部位提取工艺为:14倍量水,提取2次,每次120min;(2)生地黄总环烯醚萜苷最佳分离纯化工艺为:选用H103型大孔树脂,以1BV的上样速度上样,用3BV的去离子水水洗除杂,然后用5BV的30%的乙醇以1.5BV﹒h-1的速度洗脱,纯化后梓醇含量为8.31%;粗多糖纯化最佳方法为氯化钙法,多糖含量为60.53%;(3)生地黄总环烯醚萜苷质量标准研究结果:干燥失重为6.27%,炽灼残渣为0.35%;薄层图谱表明供试品溶液与对照品溶液在相同位置显相同颜色斑点,含量测定结果表明各指纹峰相对于梓醇含量的加和为19.21%,梓醇含量为8.32%。生地黄多糖质量标准研究结果:干燥失重为7.61%,炽灼残渣为0.29%;含量测定60.23%。(4)不同组分配伍后的止血作用实验结果表明凝血时间与总环烯醚萜苷呈正相关,总环烯醚萜苷类止血作用较好。
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