丁酸梭菌、转移因子影响肠炎沙门氏菌L50分离株致病作用的分析

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沙门氏菌是世界范围最为重要的食源性疾病之一,在生物安全系统工程中,净化禽类沙门氏菌是防控沙门氏菌病的根本。肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)是一种人畜共患沙门菌,可长期定居于成年家禽的肠道和生殖道,并持续排毒,呈现隐性感染,进一步造成禽产品的污染,并通过食物链将沙门菌传染给人类,引发严重的食品安全问题。研究肠炎沙门氏菌的排毒规律转移因子和益生菌的调控作用,更进一步为沙门氏菌病的预防及控制提供科学依据;因此本研究选用来自白羽肉鸡中分离到肠炎沙门菌L50株作为研究对象,来探究其排毒规律以及益生菌和转移因子对L50株感染SPF鸡的致病性调控作用。本研究主要进行了以下三方面探究:肠炎沙门菌L50分离株感染7日龄SPF鸡的排毒规律及其致病性。7日龄SPF鸡人工感染肠炎沙门菌L50株0.5LD50(LD500 1.905×109CFU/ML),所有实验鸡只在3h-20d采集口腔拭子进行细菌分离;采集28天剖杀鸡的喉头、肝、脾、心、肌胃、腺胃、十二指肠、盲肠制备病理组织切片。结果表明:被感染鸡在第3h即可分离到沙门氏菌(2/8),在感染后第14天,感染组口腔拭子沙门氏菌分离率达到最高(4/8);感染鸡28天剖杀,肝、脾部位有不同程度的炎性细胞浸润;盲肠绒毛上皮细胞增生,固有层炎性细胞浸润;十二指肠绒毛断裂,上皮细胞脱落。肠炎沙门氏菌L50分离株感染42日龄SPF鸡的排毒规律及丁酸梭菌的调控作用。试验试选用42日龄SPF鸡,分为3组,感染组每只口服肠炎沙门菌L50株3.5×109CFU,结果表明:2d-30d被感染鸡从粪便/口腔拭子/羽毛囊/泄殖腔拭子中分别分离到肠炎沙门菌,不同材料不同程度持续排毒,且粪便和口腔拭子持续性排毒;饲料中添加丁酸梭菌后,被感染鸡在第3h、6h、1d、18d排毒的鸡只数量减少,感染28天后盲肠内肠炎沙门氏菌定殖显著数量减少(p<0.05);血常规显示丁酸梭菌缓解细胞炎症,升高淋巴细胞比率;并且粒细胞比率降低对炎症有缓解作用;但对淋巴细胞亚群的的变化无明显影响(p>0.05)。转移因子(TFA)对肠炎沙门氏菌L50分离株感染7日龄SPF鸡的免疫调控作用。60只1日龄SPF鸡随机分为4组,每组15只,分别为空白对照组、实验组1(饮水添加TFA)、实验组2(饮水添加TFA+L50感染)、沙门菌L50分离株感染组。结果表明:感染后2-20d TFA对感染鸡的体重无明显影响(p>0.05),转移因子可使细胞免疫达到高滴度的时间提前4-5天,同时,可提高免疫机体ND的抗体滴度,且减少盲肠内沙门氏菌的定殖数量。本研究表明:肠炎沙门氏菌L50分离株感染42日龄SPF鸡后,在口腔拭子,羽毛囊,泄殖腔拭子,粪便中均可分离到沙门氏菌,但各部位之间分离结果有差异,不能互相代替;L50分离株感染42日龄SPF鸡,使用丁酸梭菌能降低沙门氏菌在不同脏器的定殖数量,减少排毒鸡只数量,丁酸梭菌可以缓解被感染SPF鸡的炎症,淋巴细胞比率升高。转移因子对沙门氏菌感染7日龄SPF鸡的体重无明显的影响,但在一定程度上可以促进中枢免疫器官指数,增强SPF鸡ND的抗体滴度,减少盲肠内沙门氏菌的定殖数量,延缓鸡排毒的时间,转移因子TFA可促进细胞免疫及体液免疫功能。
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