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[目的]:通过研究Caspase-8在二烯丙基二硫(DADS)诱导的人白血病HL-60细胞自噬与凋亡中的作用,探究DADS抑制HL-60细胞增殖的相关机制,为急性髓系白血病治疗提供实验依据和作用靶点。[方法]1.基于生物信息学数据库TCGA分析Caspase-8在急性髓系白血病与正常组织中的差异性表达和急性髓系白血病Caspase-8表达生存曲线。2.通过CCK-8和流式细胞术检测DADS诱导的急性早幼粒白血病细胞HL-60增殖抑制和凋亡。3.Western Blot检测DADS对HL-60细胞中Caspase-8表达的影响。4.CCK-8、流式细胞术和Western Blot检测Caspase-8抑制剂Z-IETD-FMK及自噬抑制剂3-MA对HL-60增殖、凋亡及自噬相关蛋白P62和LC3B的表达影响。[结果]1.急性髓系白血病骨髓组织中Caspase-8的表达比正常的骨髓组织中的表达升高,而Caspase-8高表达的急性早幼粒细胞白血病患者相对于低表达患者预后较好。2.CCK-8结果:25μMDADS组和50μMDADS组对HL-60细胞有明显的增殖抑制作用,增殖抑制率分别为:36.61±2.86%,47.53±3.21%,具有统计学意义;与阳性对照组相比,亦具有统计学意义。结果提示:DADS对HL-60细胞的增殖抑制呈时间和浓度依赖性,DADS对HL-60最佳作用浓度为50μM,最佳作用时间为48h。流式细胞术结果显示:50μM DADS对急性早幼粒白血病细胞HL-60作用48h后,凋亡率为16.54±1.12%,阳性对照Ara-c凋亡率为19.45±1.48%,DADS组,NC组和阳性对照组之间均有统计学差异(p<0.05),表明DADS能诱导HL-60细胞凋亡。3.检测DADS对HL-60细胞凋亡蛋白Caspase-8表达的影响,同时设立阴性对照组和阳性对照(Ara-c)组,Western Blot结果如下:DADS组Caspase-8的表达升高(p<0.05),但低于阳性对照组(p<0.05),结果提示:DADS能促进Caspase-8的表达,但促凋亡作用弱于阳性对照Ara-c组。4.CCK-8结果显示:DADS组和DADS+Caspase-8 inhibitor组的OD值均低于阳性对照组(p<0.05);流式细胞术结果显示:DADS+Caspase-8 inhibitor组的凋亡率低于DADS组(p<0.05),但高于阴性对照NC组(p<0.05)。提示:DADS能够通过上调Caspase-8的表达来促进HL-60的凋亡水平,促进增殖抑制。Western Blot结果显示:DADS与Caspase-8 inhibitor联用组的P62水平与DADS组相比表达水平下降(p<0.05),提示:DADS能通过促进Caspase-8的表达可以促进细胞产生自噬。5.CCK-8结果显示:3-MA+Caspase-8 inhibitor组OD值高于Caspase-8 inhibitor组,且两组均高于阴性对照NC组(p<0.05);流式细胞术结果显示:3-MA+Caspase-8 inhibitor组凋亡率低于Caspase-8 inhibitor组,且两组均低于阴性对照NC组(p<0.05);Western Blot结果显示:Caspase-8inhibitor组的LC3BII/LC3BⅠ的水平与阴性对照NC组相比明显降低,但高于3-MA组,与此同时Caspase-8 inhibitor组的P62水平高于NC组低于3-MA组(p<0.05),提示:Caspase-8可以促进LC3BⅠ向LC3BII转化,抑制P62的表达水平,促进细胞自噬。结果提示:Caspase-8通过促进HL-60自噬来促进凋亡,抑制增殖。[结论]DADS可能通过提高Caspase-8促进HL-60细胞自噬,引起细胞凋亡。