神农香菊(Dendranthema indicum var.aromaticum)是菊科菊属中一种新资源植物,本文以神农香菊中成功克隆出的DiaMYB基因为研究对象,以构建成功的含有DiaMYB基因的PCAMBIA1301-MYB表达载体,通过农杆菌蘸花法转化拟南芥,筛选培养获得成活率均为100%的三个阳性植株,继续筛选并培养至T3代。研究转基因拟南芥在盐和干旱条件下的酶活性、叶绿素含量、光合作用生理指标,构建含有绿色荧光蛋白pBI121-MYB-GFP表达载体,观察亚细胞定位。实时荧光定量分析在逆境胁迫下转DiaMYB基因植株中胁迫相关基因表达量。本文主要研究结果如下：1.利用农杆菌蘸花法将神农香菊DiaMYB基因转入拟南芥中,获得三个阳性株系,命名为MYB-1、MYB-2、MYB-3,经过PCR和GUS染色鉴定,证实DiaMYB基因已成功转入拟南芥基因组中。实时荧光定量方法分析过表达DiaMYB基因拟南芥不同器官的表达量,结果表明：在茎、叶和花中的表达量稍高,其次是果,在根中的表达量最低。利用DiaMYB基因构建含有绿色荧光蛋白融合表达载体pBI121-MYB-GFP,通过基因枪法转入洋葱表皮细胞,显示DiaMYB基因定位于细胞核上。2.取T3代转DiaMYB基因拟南芥3个株系和野生型拟南芥进行高盐胁迫,结果显示：随着盐溶液浓度的增加, 转DiaMYB基因拟南芥各株系种子的萌发率及成苗期成活率、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性、叶绿素￡L/叶绿素b、类胡萝卜素/叶绿素、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)以及胞间CO2浓度(Ci)的数值结果均得出转DiaMYB基因拟南芥各株系表现出了更强于野生型的耐盐性。高盐胁迫下的实时荧光定量PCR结果显示,转DiaMYB基因拟南芥中RD22、 RD29A、RAB18、COR47、ABA1的表达量明显增加,与此同时,ABI1、HAB1基因的表达量都稍有下降且都低于野生型植株,DiaMYB基因在盐胁迫下的表达量逐渐升高。3.取T3代转DiaMYB基因拟南芥3个株系和野生型拟南芥进行干旱胁迫,结果显示：随着干旱胁迫的递增,转DiaMYB基因拟南芥各株系种子的萌发率及成苗期成活率、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性、叶绿素a/叶绿素b、类胡萝卜素／叶绿素、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)以及胞间C02浓度(Ci)的数值结果均得出转DiaMYB基因拟南芥各株系表现出了更强于野生型的耐旱性。干旱胁迫下的实时荧光定量PCR结果显示,转DiaMYB基因拟南芥中RD22、 RD29A、RAB18、COR47、ABA1的表达量明显增加,与此同时,ABI1、HAB1基因的表达量都稍有下降且都低于野生型植株,DiaMYB基因在干旱胁迫下的表达量先升高后下降。