研究背景:毛囊自主更新能力的失调和周期性生长的异常有可能导致脱发、多毛甚至肿瘤的发生,因而对毛囊生长调控信号的研究具有很重要的临床意义。Wnt信号通路是调节胚胎毛囊形成和成体毛囊生长发育的中枢信号通路,其对毛囊的生长发育、毛囊干细胞的维持和激活、毛发的颜色与形态以及皮肤肿瘤的形成等都起了非常重要的作用。毛乳头细胞是毛囊的重要组成部分,其凝集性生长对维持和诱导毛囊再生具有重要意义。我们前期在研究凝集性与非凝集性生长的毛乳头细胞中发现了包括Annexin A2在内的28个存在差异的蛋白质。目的:研究Annexin A2对毛乳头细胞的影响及其在Wnt信号通路中的作用机制方法:通过流式细胞仪和CCK-8检测第三代和第十代毛乳头细胞之间增殖与凋亡的差异。通过构建敲低与过表达Annexin A2的腺病毒载体,进行病毒转染,分别敲低了第三代和第十代毛乳头细胞中Annexin A2。采用q RT-PCR和Western Blotting来检测第三代与第十代,敲低组与对照组,过表达组与对照组之间毛乳头细胞中的Annexin A2、凋亡因子Bcl-2和增殖因子PCNA的表达量,来验证Annexin A2对毛乳头细胞增殖和凋亡的影响。并通过免疫共沉淀技术检测能与Annexin A2相互作用的蛋白,来研究Annexin A2在毛乳头细胞中发挥作用的信号通路。结果:1.第三代毛乳头细胞的凋亡率和代表凋亡的Bcl-2明显低于第十代毛乳头细胞,增殖效率和代表增殖的PCNA则明显高于第十代毛乳头细胞。2.转染病毒后,可观察到毛乳头细胞的转染效率均>90%。q RT-PCR提示转染了敲除Annexin A2的ADV1-ANXA2后,第三代毛乳头细胞中的Annexin A2的m RNA的表达水平降低。转染了过表达Annexin A2的ADV6-ANXA2后,第十代毛乳头细胞中的Annexin A2的m RNA的表达水平增高。3.第三代毛乳头细胞转染敲除Annexin A2的ADV1-ANXA2后,对照组中的Annexin A2和代表增殖的PCNA明显高于敲低组,代表凋亡的Bcl-2明显低于敲低组。第十代毛乳头细胞转染过表达Annexin A2的ADV6-ANXA2后,过表达组的Annexin A2和代表凋亡的Bcl-2明显高于对照组,代表增殖的PCNA则明显低于对照组。4.第二代毛乳头细胞进行免疫共沉淀后,通过Western Blotting可以在NC膜上看到β-catenin、Wnt5a、Wnt1蛋白的表达。结论:Annexin A2能促进凝集性生长状态下的毛乳头细胞的增殖而抑制非凝集性生长状态下的毛乳头细胞的增殖,Annexin A2与β-catenin、Wnt5a、Wnt1蛋白之间均存在相互作用,其是通过Wnt信号通路对毛乳头细胞的生长进行调控的。