腺苷对LPS激活的小胶质细胞极化的影响

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背景:研究表明许多精神疾病如精神分裂症、情感障碍等都存在着小胶质细胞的激活及促炎细胞因子水平的升高。而现如今,精神疾病如精神分裂症、心境障碍等病因都尚未明确。研究表明精神障碍患者体内的促炎因子升高,并且此类患者脑内的小胶质细胞被激活的数量增加。小胶质细胞是中枢的固有免疫细胞,其表型多变,功能多样,有M1促炎、损伤表型,也存在有M2抗炎、促生长、修复表型。在长期中枢慢性炎症过程主要表现为M1型小胶质细胞激活占优势,从而使得脑组织细胞功能失调及受损,而M2小胶质细胞可以抑制甚至阻止此过程的发生,而如何使得促炎状态的小胶质细胞转化为M2样小胶质细胞的机制至今未明确。已知腺苷可以降低促炎细胞因子水平,但对小胶质细胞表型改变的影响仍未明确。
  材料与方法:LPS可以激活静息态的小胶质细胞为促炎的极化状态,用来模拟精神障碍类疾病患者中枢炎症状态。在LPS刺激静息态的小胶质细胞的同时加入腺苷刺激小胶质细胞,用免疫印迹、免疫荧光、酶联免疫吸附测定法来分别检测M1和M2小胶质细胞的标记物,比较不同处理方法对小胶质细胞表达细胞因子及功能蛋白的差异。
  1.LPS激活小胶质细胞并提高促炎细胞因子的水平。100ng/ml浓度的LPS培养原代小胶质细胞24小时,可促进小胶质细胞的增殖,并导致促炎细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌量均显著高于静息态的小胶质细胞。
  2.不同浓度的腺苷抑制LPS诱导的促炎细胞因子表达及促进抗炎细胞因子的升高。同时加入LPS与100μM或200μM腺苷组小胶质细胞分泌的促炎细胞因子明显低于单独使用LPS组,同时加入LPS与100μM时IL-10和IGF-1水平高于单独使用LPS组,而此时TGF-β水平与单独使用LPS组无差异。
  3.腺苷对LPS诱导的小胶质细胞极化状态呈现M2倾向。100μM腺苷与100ng/mlLPS共同处理小胶质细胞时候小胶质细胞M1的标记蛋白iNOS较单独使用LPS组升高,且此时小胶质细胞M2标记蛋白Arg1、CD206也有所升高。
  结果:综合小胶质细胞M1和M2表型蛋白的表达以及促炎和抗炎细胞因子水平变化的结果,本研究可得到如下的初步结论:炎性物质LPS激活原代小胶质细胞是小胶质细胞促炎功能增强;腺苷对LPS激活的小胶质细胞的极化状态向M2方向转化,呈现更强的抗炎效应。
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