梨f3h基因的克隆及植物载体的构建及应用RAPD技术对梨部分品种亲缘关系的探讨

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:q158166828
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论文第一部分概述了花色素基因工程研究进展。以成熟红巴梨果皮花青素相关基因f3h基因的两个片段为模板,克隆得到了f3h基因cDNA全长,并对序列进行了初步分析。核苷酸序列分析表明,该片段与苹果的f3h基因同源性高达97%。在f3h基因两侧分别引入了酶切位点,以利于植物表达载体的构建,检测表明成功地将f3h基因转入了pBI121载体。 论文第二部分主要介绍了RAPD在果树研究中的应用。对梨基因组DNA的提取作出探索,并以此为模板对影响RAPD扩增的重要参数进行优化试验,建立了梨RAPD反应的优化体系(PCR扩增体系条件是:20μ1体积中,dNTP200μM、MgCl2 2.5mM、随机引物0.2μM、DNA模板50ng、Taq酶1-2U)。用该优化体系对梨部分品种进行鉴定,探讨了它们之间的差异和亲缘关系。聚类分析结果显示,西洋梨系统与东方梨系统之间亲缘关系较远,而砂梨与白梨亲缘关系较近,不能各自聚类。
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