液芯波导阵列芯片免疫分析研究及应用

来源 :陕西师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a2009090720
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液芯波导管是由一种具有特殊光学性质的材料制成,能极大地提高传统光度法的灵敏度,以其简单、快速、低消耗引起了广泛的关注,其应用也得到了深入的发展。本论文应用液芯波导及光强差技术提高了酶联免疫分析法的灵敏度,并分别实现了对人血清中β2-微球蛋白、α-干扰素、甲胎蛋白和癌胚胎抗原的研究检测。本论文由综述和研究报告两章组成。第1章综述1.1微流动注射根据近年来所发表的有关微流动注射方面的文献,对微流动注射原理、加工技术、流体的驱动、检测系统及其在免疫分析中的应用进行了较详尽的论述。1.2液芯波导在化学中的应用论述了光导纤维的原理及应用和液芯波导在分析化学中的应用。第2章研究报告2.1液芯波导阵列芯片检测人血清及尿液中的β2-微球蛋白利用液芯波导与光强差技术测定人血清及尿样中的β2-微球蛋白。以蓝色发光二极管(Light emitting diode,LED)为光源,使用4 cm长的液芯波导管作为吸收池,在可见检测波长450nm,分析步骤采用传统的酶联免疫法的条件下,HRP的线性范围为1.0×10-13 g/mL~9.0×10-13 g/mL,检出限为3×10-14g/mL,RSD小于1%(c=3.0×10-13g/mL,n=11),线性范围的下限与检出限均比普通的光度法下降了100倍,极大地提高了酶联免疫分析法(ELISA)的灵敏度,将其应用于血清和尿液中β2-微球蛋白的免疫分析,与标准方法所得结果相符。2.2液芯波导与光强差技术相结合检测人血清中的α-干扰素(rHu IFN-α)建立了液芯波导和光强差技术联用测定人血清中α-干扰素(rHu IFN-α)的新方法。该方法采用紫色发光二极管作光源,4 cm的液芯波导管为吸收池,在可见检测波长415nm下测定人血清中的α-干扰素。分析步骤采用传统的酶联免疫方法,实验结果为HRP的线性范围是3.0×10-11~3.0×10-10g/mL,检出限是5×10-12g/mL(n=11)。2.3液芯波导阵列芯片检测人血清中的甲胎蛋白(AFP)利用微流动注射芯片与液芯波导相结合的原理,以辣根过氧化酶(HRP)催化TMB与H2O2的反应为基础,在37℃,孵育40min后生成有色物质,然后分别在自制的液芯波导阵列芯片和普通的光度计上检测HRP,该方法的灵敏度比传统的分光光度计提高了两个数量级,结果令人满意。2.4液芯波导阵列芯片检测人血清及尿液中的癌胚抗原(CEA)研究了光强差技术和液芯波导原理结合提高酶联免疫法(ELISA)灵敏度的新方法。优化了光源波长、孵育时间、进样方式等因素对实验结果的影响,结果表明,HRP的线性范围为1.0×10-13g/mL~9.0×10-13g/mL,检出限为3×10-14g/mL,与传统的光度法相比,提高了酶联免疫法的灵敏度,将其用于检测人血清中的癌胚抗原(CEA),实验结果与标准方法相符。
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