类NADPH氧化酶产生的活性氧维持大鼠神经胶质细胞的生存

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烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸)氧化酶(nicotinamide adeninedinucleotide(phosphate)oxidase,NADPH oxidase)是一种吞噬细胞的专有酶系,负责呼吸爆发时产生活性氧(reactive oxygen species,ROS)来杀死入侵的病原微生物.神经胶质细胞是中枢神经系统数量最多的细胞类群,不但对神经元起到支持、保护、营养作用,而且对神经系统的发育、神经冲动的传递、神经组织的修复与再生,以及神经免疫方面起到非常重要的作用.以前研究发现,神经系统的主要疾病,包括阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)、帕金森病(Parkinsons disease,PD)、脑卒中(Stroke)和脑神经损伤等均与ROS有密切关系,但对于ROS的确切来源却没有详细的报道.该实验以原代培养的大鼠星形神经胶质细胞为材料,目的在于阐明类NADPH氧化酶产生的ROS对细胞正常生理功能的影响.我们发现在用吞噬细胞呼吸爆发刺激剂钙离子载体或酵母多糖刺激星形神经胶质细胞时,细胞O<,2><->和H<,2>O<,2>产量均明显增加,而NADPH氧化酶的抑制剂二联苯碘(diphenylene iodonium,DPI)或夹竹桃麻素(apocynin,APO)均可以明显地降低刺激剂引起的细胞O<,2><->和H<,2>O<,2>产量增加.细胞活性测定和丫啶橙/溴化乙啶荧光双染色显示,DPI、APO、超氧化物歧化酶+过氧化氢酶均能明显降低星形神经胶质细胞的活性,并表现出浓度和时间依赖性,而周期性地补加H<,2>O<,2>可以显著地恢复细胞的活性,因此,该实验表明,类NADPH氧化酶介导产生的ROS是大鼠神经胶质细胞生存的必须条件.
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