毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)是一类以毛细管为分离通道,以高压电场为驱动力,以样品的多种特性为依据的液相微分离分析技术,是继气相色谱(gas chromatography, GC)和高效液相色谱(high-performance liquid chromatography, HPLC)之后分析科学的又一重大进展,它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞、乃至单分子分析成为可能。CE具有分离效率高、样品消耗量低、分析时间短、操作简单等优点,是一种新颖的微量分离分析技术。电化学发光(electrochemiluminescence, ECL)检测是一种灵敏的检测方法,与其它检测方法相比,其检测灵敏度高、线性范围宽、试剂耗量少和仪器简单等优点。在电化学发光中,三联吡啶钉(Ru(bpy)32+)是电化学发光检测体系中应用最广的-利,检测技术,在蛋白质、氨基酸和药物等领域己得到越来越广泛的应用。将CE分离与ECL检测技术相结合,就产生了CE-ECL检测技术。其中,CE与Ru(bpy)32+ECL联用技术获得了重要的发展,其兼备CE的高效分离和ECL的灵敏检测,是分析复杂样品中痕量组分的有效手段。本文利用CE与Ru(bpy)32+ECL联用技术,开展了多种重要药物的分析检测,主要研究内容和创新点如下1.利用CE-Ru(bpy)32+ECL联用技术构建了一种同时检测普鲁卡因(procaine, Pro)、利多卡因(lidocaine, Lid)、罗哌卡因(ropivacaine, Rop)和布比卡因(bupivacaine, Bup)的新方法。混合胶束的使用显著的改善了分离的选择性和分离效率。类普鲁士蓝(Eu-PB)修饰的铂工作电极提高了检测灵敏度。系统研究了影响毛细管电泳分离和电化学发光检测的条件。在优化条件下,四种局部麻醉药在9min内获得基线分离。Pro, Lid, Rop和Bup的检出限(S/N=3)分别2.5×10-8、1.3×10-8、3.0×10-s和4.1×10-8mol/L; Pro, Lid, Rop和Bup的定量限(S/N=10)分别为2.3×10-7、1.2×10-7mol/L、3.7×10-7和5.6×10-7mol/L(尿样中)和8.5×10-7、6.9×10-7、2.8×10-6和1.1×106mol/L(血清中)。四种分析物在尿样血清中的不同浓度水平加标回收率在85.7-107.6%范围之间,且相对准偏差(RSD)不大于3.6%。将所提出的方法成功应用于人体液中的四种局部麻醉药的分离分析。为了实现分析物在实际生物样品中的定量分析,分别测定了四种局麻药物在尿样和血清中的定量限和线性范围。2.建立一种CE-Ru(bpy)32+ECL内标同时灵敏险测盐酸麻黄碱(ephedrine, E)、盐酸甲基麻黄碱(methylephedrine, ME)和盐酸伪麻黄碱(pseudoephedrine, PE)的新力法。利用离子液体BMIMBF4加入到电泳缓冲溶液中后有效地改善了三种分析物和内标物的分离效率和检测灵敏度。使用三丙胺作为内标物,大大的提高了方法的精密度和准确度。对毛细管电泳分离条件、电化学发光检测条件和离子液体的影响作了系统研究。最佳优化实验条件下,三种分析物和内标物实现了良好的分离。E、ME和PE的检出限(S/N=3)分别为4.0×10-8、6.5×10-8和4.6×10-8mol/L；在尿样中E、ME和PE的定量限(S/N=10)分别为5.3×10-7、9.1×10-7和6.9×10-7mol/L。外标法测得日内和日间迁移时间相对标准偏差分别不高于0.8%和1.4%,峰面积相对标准偏差分别不高于3.5%和5.4%；内标法测得日内和日间迁移时间的标准偏差分别不高于2.5%和3.9%,峰面积相对标准偏差分别不高于0.2%和0.8%。三种分析物在传统中药中的不同浓度下的加标回收率为85.6-108.4%。将提出的新方法成功用来定性定量分析传统中药中所含的三种麻黄碱,同时还用于人尿样中三种麻黄碱的分离检测,并对人体内PE的尿样药代动力学进行了研究。为了实现分析物在实际生物样品中的定量分析,分别测定了三种麻黄碱类药物在传统中药和尿样中的定量限和线性范围。