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目的:研究Lnc RNA HULC对ABCC1、m TOR的调控作用,以及HULC、m TOR和ABCC1三者之间的关系,从而探讨HULC对肝癌药物敏感性的影响。方法:实时定量RT-PCR检测细胞中HULC、ABCC1的m RNA含量水平的影响;Western blotting方法检测细胞中ABCC1、m TOR、p-m TOR蛋白表达的影响;MTT法检测细胞对5-FU、DDP的药物敏感性;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况,EDU检测细胞增殖情况。结果:实时定量RT-PCR检测结果显示,正常肝细胞L-O2,肝癌SMMC-7721、Hep G2细胞中,Lnc RNA HULC在Hep G2细胞中m RNA表达量明显高于L-O2、SMMC-7721中的表达;si-HULC能显著降低ABCC1的m RNA表达结果(L-O2、SMMC-7721、Hep G2细胞中si-HULC处理组ABCC1的m RNA的相对表达量为1.08±0.07、0.77±0.33)。MTT检测结果显示,si-HULC处理组的细胞存活率明显低于NC组(转染si-HULC后,细胞存活率是NC的0.76倍),差异有统计学意义。体外培养Hep G2细胞,转染NC,si-HULC后,分别用不同浓度的5-FU(μM)0、50、500、5000、50000;顺铂(μM)0、12.5、25、50、100处理细胞,MTT检测结果表明,用5-FU浓度分别为0、50、500、5000、50000(μM)处理细胞后,转染了si-HULC后的Hep G2细胞存活率明显低于NC组(p<0.05),差异有统计学意义,其中5-FU浓度5000μM时,效果显著,后期处理均采用此浓度;用顺铂浓度分别为0、12.5、25、50、100(μM)处理后,转染了si-HULC后的Hep G2细胞存活率明显低于NC组(p<0.05),差异有统计学意义,其中DDP浓度50μM时,效果显著,后期处理均采用此浓度。体外培养Hep G2细胞,转染NC,si-HULC后,接着分别加入浓度为5000μM的5-FU,50μM的DDP,分别处理24、48、72h后,48h处理组效果明显,后期处理均采用此时间。体外培养Hep G2细胞,转染NC,si-HULC后,接着分别加入浓度为5000μM的5-FU,处理48h后,si-HULC能增加Hep G2细胞对5-FU的药物敏感性(si-HULC处理组的细胞存活率是NC组的0.62倍),差异有统计学意义。转染NC,si-HULC后,加入浓度为50μM的DDP,处理48h后,si-HULC能增加Hep G2细胞对DDP的药物敏感性(si-HULC处理组的细胞存活率是NC组的0.75倍),差异有统计学意义。EDU检测结果证实,瞬时转染NC,si-HULC,发现si-HULC能显著降低Hep G2细胞的增殖,差异有统计学意义。体外培养Hep G2细胞。瞬时转染NC、si-HULC,24h后分别用5000μM的5-FU、50μM的顺铂处理细胞48h,转染了si-HULC后的Hep G2细胞增殖率明显低于NC组(p<0.05),差异有统计学意义。Western blotting检测结果表明,Hep G2细胞中ABCC1的蛋白表达明显高于L-O2(Hep G2细胞中ABCC1/β-actin的灰度比值是L-O2的0.82倍)。体外培养Hep G2细胞,转染NC,si-HULC,si-HULC能显著降低ABCC1的蛋白表达(转染si-HULC后ABCC1/β-actin在Hep G2细胞中灰度比值是NC的0.80倍)。体外分别同时培养正常肝细胞L-O2,肝癌Hep G2细胞,L-O2、Hep G2细胞中m TOR的蛋白表达无明显差异,p-m TOR的蛋白表达明显高于L-O2(Hep G2细胞中p-m TOR/β-actin的灰度比值是L-O2的0.53倍);加入800n M的RAPA处理细胞,发现RAPA也能降低ABCC1的蛋白表达(加入RAPA后ABCC1/β-actin在Hep G2细胞中灰度比值是NC的0.65倍);转染NC,si-HULC,Westrn bloting结果发现si-HULC能显著降低m TOR、p-m TOR的蛋白表达(转染si-HULC后m TOR/β-actin、p-m TOR/β-actin在Hep G2细胞中灰度比值是NC的0.85、0.43倍);另外,加入800n M的RAPA处理细胞,RAPA也能降低m TOR、p-m TOR的蛋白表达(加入RAPA后m TOR/β-actin、p-m TOR/β-actin在Hep G2细胞中灰度比值是NC的0.48、0.69倍)。实验结果证明,Hep G2细胞中,HULC能增加m TOR、p-m TOR的蛋白表达。流式细胞术检测结果表明,si-HULC能对细胞周期和凋亡有影响,相比于未处理组,si-HULC后细胞G1/S期受到阻滞,细胞凋亡率增加。瞬时转染si-HULC24h后分别用5000μM的5-FU、50μM的DDP处理细胞,相比于未转染组,si-HULC组细胞G1/S期阻滞增加,si-HULC组细胞凋亡率增加。结论:1、干扰Lnc RNA HULC能抑制肝癌细胞的增殖,降低细胞存活率。2、干扰Lnc RNA HULC可以下调m TOR的表达,从而下调ABCC1的表达。3、干扰Lnc RNA HULC能增加Hep G2细胞对5-FU和DDP的敏感性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,细胞周期的G1/S期阻滞增加。