目的:本研究为国家自然科学基金“基于mi RNA-146a和TLR/NF-κB信号通路探讨土家族药三百棒抑制RA滑膜增殖的作用机制”(81360672)和风湿病发生与干预湖北省重点实验室课题“飞龙掌血外用抗RA的疗效及作用机制初探”中的部分内容。本研究旨在探讨土家族药物三百棒外用治疗类风湿关节炎的治疗作用,初步探讨其作用机制。方法:采用改良寇氏法开展三百棒细粉、水提取组分、醇提取组分和乙酸乙酯提取组分的小鼠口服急性毒性研究,并以SD大鼠进行验证;在胶原诱导性关节炎模型基础上给予风寒湿刺激,制作符合中医特色的风寒湿痹证RA动物模型;以实验室自制的三百棒凝胶为干预药物,以万通筋骨贴为阳性对照,以正常组大鼠和模型大鼠为空白对照,评价其对RA大鼠的一般体征、脚踝周径、炎症评分的影响,并采用流式细胞技术,考察其对RA大鼠外周血中T淋巴细胞亚群表面特异性抗原含量的影响及Th1/Th2漂移的影响。结果:(1)三百棒全组分(三百棒细粉)的最大耐受量为28.57g/kg,半数致死量为3.464g/kg,而其水提取组分、醇提取组分和乙酸乙酯提取组分的半数致死量分别为4.005 g/kg、3.196g/kg和2.901g/kg,根据各组分的收率换算,即相当于生药量分别为49.40 g/kg,35.86 g/kg,30.98 g/kg。同一剂量下(28.57g/kg)下小鼠死亡率为乙酸乙酯提取物>醇提取物>全组分>水提取物。小鼠灌胃三百棒不同组分后的主要急性毒性症状表现为烦躁、多动、口唇四肢尾巴青紫,流涎、眼睛充血流泪甚至出现弓腰缩腹、打滚、呼吸衰竭死亡等。(2)风寒湿痹证组脚踝关节周径显著高于CIA诱导组,外周血免疫因子TNF-α、IFN-γ均显著高于正常组和CIA诱导组,滑膜液中TNF-α显著高于正常组和CIA诱导组;CIA诱导组和风寒湿痹证组股骨和尺骨的骨密度均显著性降低(P<0.05),且骨组织形态结构也发生异常变化;其中,风寒湿痹证组骨密度下降更为明显,骨组织形态结构甚至出现断裂和扭曲。(3)模型组大鼠CD4+/CD3+、CD8+/CD3+均显著降低,三百棒凝胶组大鼠外周血中T淋巴细胞表面特异性抗原CD4+/CD3+、CD8+/CD3+与模型组和治疗前均有显著性差异,均升高至正常水平;类风湿关节炎模型大鼠IFN-γ/IL-4失衡,向促炎因子方向移动;给予三百棒凝胶外用治疗后,其平衡向抑炎因子方向移动。结论:三百棒口服给药存在一定的急性毒性,长期使用对肝、肾功能可能造成严重的损害,外用是一种更为安全、可行的给药途径;三百棒外用对类风湿关节炎具有一定的治疗作用,该治疗作用是通过调节其T淋巴细胞表面特异性抗原的表达、改善Th1/Th2失衡状态实现的。