目的：观察神经干细胞体外培养，通过实验掌握神经干细胞增殖分化过程培养液的条件，了解神经干细胞生长的相关影响因素；观察神经节苷脂（GM1）和鼠神经生长因子（NGF）两种神经营养药物对神经干细胞增殖分化的影响，探讨药物的有效剂量，阐明药物与培养液成分之间的相互关系；为今后临床神经干细胞移植后续药物治疗奠定基础，为临床应用干细胞治疗神经系统疾病的综合治疗提出科学依据。 方法：1.从胎鼠脊髓分离体外培养神经干细胞；2.将含有表皮生长因子(Epidermal Growth Factor，EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor，bFGF)的NSCs完全培养液，及不含bFGF、EGF的DMEM/F12培养液作为两种不同的培养介质，分别加入不同浓度的GM1和NGF。3.显微镜下观察神经干细胞体外增殖，应用MTT法（Methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）和细胞球计数，分析上述药物添加前后NSCs增殖情况；4.应用免疫组化法及Western blot法分析上述药物添加前后表达各种细胞因子的细胞体积和数量的改变。 结果：1.细胞培养5-7d后，细胞生长为数十到数百个细胞的悬浮球形克隆。2.细胞球计数和MTT测定结果表明，在含有bFGF、EGF的NSCs培养液中，较高浓度GM1条件下，干细胞增殖明显（P<0.05）。3.免疫组化结果显示，GM1浓度增加，Nestin表达细胞体积增大，NGF组表达神经元特异性烯醇化酶(Neuro Specific Enolase，NSE)、血清胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP)的细胞比率增加。Western blot 显示GM1组Nestin表达明显，而NGF组GFAP和NSE表达明显。 结论：1.神经干细胞体外培养，细胞生长良好。2.GM1对神经干细胞的增殖有影响，且有一定的量效关系，高浓度GM1能促进NSCs增殖。3.NGF能促进NSCs分化，且有一定的量效关系，高浓度NGF能促进NSCs分化。