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为了确定丁香酚麻醉鲤鱼的作用机制,通过观察NMDA受体激动剂和拮抗剂对丁香酚麻醉鲤鱼效果的影响,探究NMDA受体拮抗剂对丁香酚麻醉鲤鱼量效曲线的变化,以及麻醉鲤鱼后对小脑和脊髓中兴奋性、抑制性氨基酸递质含量的影响,考察丁香酚麻醉是否与鲤鱼中枢神经系统中的NMDA受体有关;探讨丁香酚麻醉鲤鱼的分子机制。为提高鱼类全麻药安全性,揭示鱼类大脑功能奥秘有和开发新的、高效低毒鱼类全麻药提供理论依据。1、48尾鲤鱼,体重为700g~800g,随机分为1个空白对照组和5个麻醉组,每组8尾;麻醉组先腹腔注射100 umol/L NMDA受体拮抗剂MK-801,每尾0.3mL,对照组注射相同体积的生理盐水。注射后放入清水中10 s。分别放置于不同浓度的丁香酚溶液中观察麻醉效果;结果表明:NMDA受体拮抗剂可以加快鲤鱼进入麻醉的时间,苏醒时间延长,且麻醉鲤鱼的腮动次数显著(p<0.05)减小,离水暴露在空气中开始弹动的时间延长,每分钟弹动的次数显著减少(p<0.05),因此,NMDA受体拮抗剂有增强丁香酚对鲤鱼的麻醉作用。2、取鲤鱼40尾,随机分5个麻醉组,每组8尾;麻醉组先腹腔注射100 umol/L NMDA受体激动剂精胺胺溶液,每尾0.3 mL,对照组注射相同体积的生理盐水。注射后放入清水中10 s。分别放置于不同浓度的丁香酚溶液中观察麻醉效果;结果表明:NMDA受体的激动剂可以使鲤鱼进入麻醉的时间变长,恢复期变短。且麻醉鲤鱼的腮动次数显著(p<0.05)减小;离水暴露在空气中开始弹动的时间缩短,每分钟弹动的次数明显(p<0.05)增多。因此,NMDA受体激动剂具有减弱丁香酚对鲤鱼的麻醉作用。3、取鲤鱼64条,随机分为8个组,每组8条,研究丁香酚麻醉组和丁香酚麻醉拮抗剂组与鲤鱼麻醉后在清水中恢复到正常时间量效曲线的变化。结果:NMDA受体拮抗剂+MK-801与丁香酚的量效曲线曲线不平行,作用原点可能一致,斜率和最大效应发生改变,说明丁香酚与+MK-801作用于不同受体,NMDA受体不是丁香酚麻醉鱼类的作用位点。4、取鲤鱼21条,分为1个空白对照组、3个丁香酚麻醉对照组、3个NMDA受体拮抗剂组,每组3条;应用高效液相色谱方法,考察鲤鱼小脑和脊髓中兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸含量的变化。结果表明:丁香酚在最适麻醉浓度范围内,NMDA受体拮抗剂组与对照组相比,小脑和脊髓中谷氨酸和甘氨酸的含量均出现降低,而天冬氨酸和γ-氨基丁酸的含量均出现升高。说明NMDA受体拮抗剂增强丁香酚麻醉鲤鱼的效果,可能通过改变小脑和脊髓中兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸含量有关。5、取鲤鱼21条,分为1个空白对照组、3个丁香酚麻醉对照组、3个NMDA受体激动剂组,每组3条;应用高效液相色谱方法,考察鲤鱼小脑和脊髓中兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸含量的变化。结果表明:在最适麻醉浓度范围内,NMDA受体激动剂组与对照组相比,鲤鱼小脑中谷氨酸含量降低;天冬氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸的含量增加。而脊髓中的谷氨酸和γ-氨基丁酸的含量降低;天冬氨酸,甘氨酸的含量增加。