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目的:探讨鼻黏膜上皮中一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase,NOS）的表达情况;探讨地塞米松（dexamethasone,Dex）通过一氧化氮（Nitric Oxide,NO）对紧密连接蛋白（Tight junctions,TJs）损伤细胞模型的影响及机制;探讨鼻呼出气一氧化氮（nasal nitric oxide,nNO）在诊断嗜酸性粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉（eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,Eos CRSwNP）的临床价值。方法:（1）分别采用免疫组化,qRT-PCR,Western blot检测20例Eos CRSwNP患者及20例非嗜酸性粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉（nonesinophilc chronic rhinosinusitis with nasal polyps,non-Eos CRSwNP）患者鼻息肉组织及20例对照组下鼻甲组织中三种TJs:Claudin-1、Occludin及ZO-1和两种NOS:诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）及内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的表达及组织定位情况。（2）从对照组下鼻甲组织中提取人鼻黏膜原代上皮细胞（Human nasal epithelial cells,HNECs）,使用不同浓度及不同时间的IL-13刺激,根据TJs破坏水平选定适宜浓度及时间,造成TJs损伤的HNECs模型。（3）在TJs损伤细胞模型中加入不同浓度Dex,使用qRT-PCR及Western blot评估TJs的及PI3K/Akt/eNOS通路的表达变化,使用免疫荧光染色观察上皮标志物Occludin的变化,使用griess法检测HNECs中NO的生成,使用流式细胞术检测细胞凋亡。（4）分别加入eNOS抑制剂（L-NAME）或Akt抑制剂（MK-2206）与Dex共同处理TJs损伤HNECs模型,qRT-PCR及Western blot检测TJs及PI3K/Akt/eNOS通路的表达情况,使用griess法检测HNECs中NO的生成。（5）纳入84例non-Eos CRSwNP患者,55例Eos CRSwNP患者,37例对照组受试者的全部临床资料进行回顾性分析,分析其nNO水平、nNO与其他临床指标相关性以及nNO对区分不同内型CRSwNP的诊断价值。结果:（1）组织实验:TJs分子Claudin-1,Occludin,ZO-1在鼻息肉中的表达较对照组明显下降,有统计学差异（p＜0.05）;Eos CRSwNP组中Claudin-1,Occludin,ZO-1的蛋白表达均低于non-Eos CRSwNP组,有统计学差异（p＜0.05）;iNOS在鼻息肉中的表达较对照组中升高,有统计学差异（p＜0.05）,但在Eos CRSwNP及non-Eos CRSwNP组中无明显差异;鼻息肉中eNOS及p-eNOS表达的相比对照组显著升高,Eos CRSwNP组的p-eNOS的表达较non-Eos CRSwNP组明显升高,具有统计学差异（p＜0.001）。（2）TJs损伤的HNECs模型建立:以不同浓度及不同时间IL-13处理HNECs后,发现10ng/ml的IL-13刺激HNECs后TJs表达均下降,在36h时下降趋势最为明显,提示造模成功。（3）Dex干预对TJs损伤细胞模型的影响:Dex使细胞模型的TJs表达明显升高,当Dex浓度为10-5mol/L时,TJs表达升高最明显,NO表达最高;免疫荧光观察到TJs损伤细胞模型的结构松散,Occludin荧光强度降低,Dex干预后,Occludin细胞结构及荧光强度显著恢复（p＜0.05）;Dex也显著升高了pAkt及p-eNOS水平,与对照组相比差异具有统计学意义（p＜0.001）;TJs损伤细胞模型中可见凋亡,而Dex干预可抑制细胞模型的凋亡,差异具有统计学意义（p＜0.05）。（4）Dex干预TJs损伤细胞模型的机制验证:eNOS抑制剂L-NAME加入到Dex干预的TJs损伤细胞模型后,观察到p-eNOS及NO的产生降低,同时Dex对细胞模型中TJs的恢复作用也被抑制（p＜0.05）;Akt抑制剂MK-2206加入到Dex干预的细胞模型后,观察到p-Akt及NO的产生降低,同时下游的peNOS也被抑制,Dex对TJs的恢复作用也随之被抑制（p＜0.05）。（5）临床回顾性分析:Eos CRSwNP患者nNO水平较non-Eos CRSwNP患者升高,有统计学差异（p＜0.001）;Eos CRSwNP患者的nNO水平与鼻窦CT评分（Lund-Mackay Score）呈负相关（r=-0.507,p＜0.001）,与血嗜酸性粒细胞百分比（EOS percentage）呈正相关（r=0.307,p=0.023）;结合nNO+CT后筛评分+EOS百分比的拟合指标具有较好的诊断Eos CRSwNP的能力（AUC=0.869）。结论:（1）组织实验:CRSwNP鼻息肉中TJs被破坏;Eos CRSwNP组中TJs破坏程度较non-Eos CRSwNP组更明显。CRSwNP鼻息肉中iNOS、eNOS及p-eNOS显著升高,且Eos CRSwNP组中p-eNOS较non-Eos CRSwNP组上调更显著。（2）细胞实验:IL-13刺激可以成功建立TJs损伤的HNECs细胞模型并促进细胞凋亡;Dex可通过PI3K/Akt/eNOS信号通路促进NO生成并保护TJs;Dex可抑制IL-13诱导的HNECs凋亡。（3）回顾性研究:Eos CRSwNP患者的nNO水平与血EOS浸润程度呈正相关,与鼻窦Lund-Mackay Score呈负相关,nNO的引入,可进一步增加临床诊断Eos CRSwNP的可靠性。