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目的研究不同培养箱内温度和p H值对小鼠体外受精及胚胎发育的影响,探索较为优化的体外受精培养箱内温度及p H值,为人类辅助生殖技术提供较规范的实验方法与数据。方法采用小鼠卵母细胞与精子进行体外受精,并将受精后的胚胎置于胚胎培养液中培养,分别将培养箱温度设在36.4℃、36.7℃、37.0℃、37.3℃、37.6℃,观察、计数D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率,应用激光共聚焦显微镜检测胚胎染色体的畸变类型及计算畸变率。分别将培养液p H值设在7.05、7.20、7.35、7.50、7.65,观察、计数D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率,应用激光共聚焦显微镜观察胚胎纺锤体的改变情况。结果1培养箱内温度在小鼠配子体外受精及胚胎发育影响方面,受精率在37.0℃时最高,36.4与37.0℃组比较无统计学差异(P>0.005),36.4与37.3℃组比较(P>0.005),无统计学差异,36.4与37.6℃组比较(P<0.005),有统计学差异,说明在36.4-37.3℃之间较适合配子受精。卵裂率在36.7℃时最高,36.4与37.0℃组比较无统计学差异(P>0.005),36.4与37.3℃组比较(P>0.005),无统计学差异,36.4与37.6℃组比较(P<0.005),有统计学差异,说明在36.4-37.3℃之间时较适合受精卵卵裂。囊胚形成率在37.0℃时最高,36.4与37℃组比较有统计学差异(P<0.005),36.7与37.0℃组比较无统计学差异(P>0.005),36.7与37.3℃组比较有统计学差异(P>0.005),说明在36.7-37.0℃之间较适合囊胚形成。囊胚孵出率在37.0℃时最高,36.4与37.0℃组比较有统计学差异(P<0.005),36.7与37.0℃组比较无统计学差异(P>0.005),36.7与37.3℃组比较有统计学差异(P>0.005),说明在36.7-37.0℃之间较适合囊胚孵出。2培养箱内培养液p H值在小鼠体外受精及胚胎发育影响方面,配子受精率在p H7.50最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P<0.005),p H7.20与7.65组比较无统计学差异(P>0.005),说明在7.20-7.65之间较适合配子受精。卵裂率在p H7.35最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P<0.005),p H7.20与7.50组比较无统计学差异(P>0.005),p H7.5与7.65组比较有统计学差异(P<0.005),说明在7.20-7.50之间较适合受精卵卵裂。囊胚形成率在p H7.50最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P<0.005),p H7.20与7.50组比较无统计学差异(P>0.005),p H7.50与7.65组比较有统计学差异(P<0.005),说明在7.20-7.50之间较适合囊胚形成。囊胚孵出率在p H7.35最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P<0.005),p H7.20与7.50组比较无统计学差异(P>0.005),p H7.50与7.65组比较有统计学差异(P<0.005),说明在7.20-7.50之间较适合囊胚孵出。结论1培养箱内温度36.4℃-37.3℃之间较适合配子受精、受精卵卵裂。36.7℃-37.0℃之间较适合囊胚形成、囊胚孵出。2培养箱内培养液p H值7.20-7.65之间较适合配子受精,7.20-7.50之间较适合受精卵卵裂、囊胚形成及囊胚孵出。