第一部分单瓣牛心包补片血液相容性的动物实验研究目的通过比较改性符合交联处理过的单瓣牛心包(VBP)与单瓣自体心包(VAP)在体内、体外血液相容性各项指标的检测结果,说明VBP是否具有良好的血液相容性;通过观察动物模型是否能够存活及是否存在严重并发症,说明使用VBP进行手术操作的可行性。方法(1)建立动物模型,15只雄性小尾寒羊,随机分成实验组(VBP组,n=9)和对照组(VAP组,n=6),在全麻体外循环下将一个肺动脉瓣环连同部分肺动脉壁和右室流出道心肌剪除,实验组用VBP重建,对照组用术中缝制瓣兜的VAP重建;(2)体内血液相容性检测,检测实验组与对照组实验动物造模前后静脉血中的f Hb、血常规各项(包括RBC、HGB、PLT、WBC、NEUT、NEUT%)指标,并进行比较;(3)体外血液相容性检测,将15只实验动物的静脉血液在体外分别与实验组(VBP组,n=15)和对照组(VAP组,n=15)接触后进行溶血试验、补体激活试验(C3a、C5a、TCC、Bb、C4d)、血浆可溶性P-选择素试验以及体外动态凝血试验,并进行比较。结果(1)入组实验动物全部存活,未出现严重并发症;(2)体内血液相容性检测中,红细胞损伤评价结果为VBP组与VAP组中f Hb含量在术前、术后1天、术后3天、术后7天对应时间点上无显著差异(p>0.05),术后1天f Hb含量较术前明显增加(p<0.05);血常规检测结果为VBP组与VAP组RBC、HGB、PLT、WBC、NEUT、NEUT%各指标在对应的时间点比较均无差异显著性(p>0.05),VBP组与VAP组中RBC及HGB在术后较术前降低,第3天降至最低(p<0.001);WBC,NEUT及NEUT%在术后第3天升高(p<0.05);PLT术后第1-3天较术前下降(p<0.05);(3)体外血液相容性检测中,溶血实验结果为VBP组溶血率(1.28±0.14%)与VAP组溶血率(1.26±0.06)均小于5%,两者相比较差异无显著性(p>0.05);VBP组与VAP组在补体激活实验中测定C3a、C5a、Tcc、C4b、Bb各项指标含量相比较差异无显著性(p>0.05);VBP组与VAP组在血浆可溶性P-选择素测定含量相比较差异无显著性(p>0.05);VBP组与VAP组在体外动态凝血试验中在各个时间点上所测得的OD值差异无显著性(p>0.05)。结论VBP与VAP接近,具有良好的血液相容性;VBP具有手术操作的可行性。第二部分单瓣牛心包补片的组织相容性及抗钙化性的动物实验研究目的通过比较改性符合交联处理过的单瓣牛心包(VBP)与单瓣自体心包(VAP)在手术造模过程中的操作证实VBP是否具有手术操作可行性;通过心脏彩超测量动物模型的肺动脉瓣返流面积及跨瓣压差证实VBP的瓣膜功能;通过标本的病理观察证实VBP的组织器官相容性;通过钙含量测定证实VBP是否具有较好的抗钙化性能。方法(1)建立动物模型,15只雄性小尾寒羊,随机分成实验组(VBP组,n=9)和对照组(VAP组,n=6),在全麻体外循环下将一个肺动脉瓣环连同部分肺动脉壁和右室流出道心肌剪除,实验组用VBP重建,对照组用术中缝制瓣兜的VAP重建,并记录手术时间、体外循环时间、主动脉阻断时间;(2)VBP组与VAP组动物模型在术中、术后1个月、3个月、6个月分别行心脏彩超检查,测量计算肺动脉瓣返流面积及跨肺动脉瓣压差,并进行比较;(3)动物模型饲养至术后6个月,取出VBP和VAP以及相关脏器(包括心、肝、脾、肺、肾、脑)进行病理学观察(包括肉眼、光镜、扫描电镜);(4)对移植后VBP和VAP的钙含量进行测定,并进行比较。结果(1)入组实验动物全部存活,术后未出现严重并发症,本次动物造模手术过程中,整体手术时间VBP组(126±13.2min)较VAP组(151±15.6min)用时少(p<0.05);体外循环时间VBP组(73±8.6min)较VAP组(98±11.5min)用时少(p<0.05);主动脉阻断时间VBP组(33±6.8min)较VAP组(58±7.4min)用时少(p<0.05);(2)心脏彩超测量肺动脉瓣返流面积的结果为,术中与术后1个月时VBP组与VAP组相比较差异无显著性(p>0.05),术后3个月与术后6个月时VBP组较VAP组返流面积更小(p<0.05),VBP组术后6个月(1.87±0.32cm2)与手术当日(1.76±0.53cm2)相比较,差异无显著性(p>0.05);VAP组术后6个月(2.54±0.35cm2)与手术当日(1.81±0.48cm2)相比较,返流加重(p<0.05);(3)心脏彩超测量计算跨肺动脉瓣压差结果为,术中、术后1个月、术后3个月、术后6个月时VBP组与VAP组相比较差异无显著性(p>0.05);(4)动物模型术后饲养6个月取出标本进行病理观察,肉眼可见VBP与VAP补片瓣兜质地柔软,开闭功能正常,瓣兜未见血栓,内壁颜色与自体肺动脉内壁颜色接近或一致,移行处平整光滑,吻合处未见增生、坏死等改变,其他脏器无病理改变;HE染色光镜下观察可见VBP与VAP致密纤维结缔组织,局部纤维母细胞增生,灶状淋巴、浆细胞浸润,局灶可见手术缝线,未见血栓,内壁均可见内皮细胞附着,其他脏器未见病理改变;扫描电镜可见术前VBP内壁纤维结构排列整齐致密,期间附着细胞较少,术后VBP可见内皮细胞附着,纤维结构仍然排列紧致,未见疏松、断裂等情况;(5)流出道补片钙含量测定结果为,VBP组(1834±53μg/g)与VAP组(1795±61μg/g)相比较差异无显著性(p>0.05)。结论手术过程中,单瓣牛心包操作相对简单,手术耗时少,优于自体心包,手术具有可行性;VBP具有较好的抗返流功能;VBP具有较好的组织器官相容性;VBP具有良好的抗钙化性能。