黄连素(Berberine,BBR)又名小檗碱,是一种异喹啉类生物碱。据报道,黄连素具有多种药理作用,其中包括抗菌、抗癌、抗氧化和抗炎等。巨噬细胞(Macrophages)是广泛分布于机体的先天免疫细胞,在各种生理和病理过程中发挥不同的作用。氧化应激是指细胞或组织中产生和积累的活性氧与生物系统对这些反应产物的解毒能力不平衡而引起的一种现象。炎症反应是对微生物感染和组织损伤的一种快速而协调的反应,会导致导致免疫细胞向感染或损伤部位迁移。β-羟丁酸(β-hydroxybutyrate,β-HB)在奶牛血液中的浓度与皱胃变位的发病率存在一定的相关性。研究发现,奶牛的围产期是发生皱胃变位的高发期,在这期间,奶牛存在广泛的氧化应激与炎症反应,机体内的能量代谢与免疫能力都产生了很大的变化。因此,研究对牛巨噬细胞的氧化应激以及炎症反应的保护对初步探究奶牛皱胃变位具有一定的意义。本论文以黄连素为研究对象,通过体外试验,探讨黄连素对β-羟丁酸诱导的牛巨噬细胞(Bovine macrophage,BM)的氧化应激以及炎症反应的影响。本试验首先,利用CCK-8法检测不同浓度(5,7.5,10μmol/L)的黄连素以及β-HB(2.4mmol/L)对牛巨噬细胞的活性影响,建立β-HB诱导牛巨噬细胞的氧化应激以及炎症反应模型并进行药物干预。结果显示,黄连素(5,7.5,10μmol/L)以及β-HB(2.4 mmol/L)对牛巨噬细胞无毒性。其次,利用试剂盒检测牛巨噬细胞内ROS、MDA、SOD、CAT的水平,并用Western blot技术检测Nrf2信号通路相关蛋白的表达,探索黄连素对β-羟丁酸诱导的牛巨噬细胞氧化应激的影响。结果显示,黄连素能够抑制牛巨噬细胞中ROS以及MDA的产生。并且,能够使牛巨噬细胞中SOD以及CAT的含量显著上升。同时,上调Nrf2、HO-1的表达水平。以上结果证实,黄连素对β-羟丁酸诱导的牛巨噬细胞的氧化应激有保护作用。最后,用荧光定量法检测IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平,同时,采用Western blot技术检测NF-κB信号通路相关蛋白的表达。结果表明:黄连素能够抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平,同时黄连素通过下调IκB和P65磷酸化水平,抑制NF-κB信号通路的激活。以上结果证实,黄连素对β-羟丁酸诱导的牛巨噬细胞的炎症反应有保护作用。本论文初步证实了黄连素对β-羟丁酸诱导的牛巨噬细胞的氧化应激以及炎症反应有保护作用。以上结果可为黄连素对牛巨噬细胞产生的氧化应激以及炎症反应的相关研究提供数据参考。同时,进一步为研究黄连素对奶牛皱胃变位的防治提供实验依据。