【摘 要】
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本研究通过对乳双歧杆菌V9的培养基及静态培养条件的优化,探究该菌株高密度发酵的工艺条件及配方,得到了以下相关结论：(1)以TPY培养基为基础,通过对碳源、氮源、碳氮源比例、
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本研究通过对乳双歧杆菌V9的培养基及静态培养条件的优化,探究该菌株高密度发酵的工艺条件及配方,得到了以下相关结论：(1)以TPY培养基为基础,通过对碳源、氮源、碳氮源比例、微量元素、缓冲盐以及生长因子等因素的筛选,并采用Design Expert 7.0软件对各成分进行了响应面设计从而对各成分的添加量进行优化,得到乳双歧杆菌V9的最优培养基为：乳糖3.5%、大豆蛋白胨1.31%、酵母胨0.88%、酵母粉1.31%、Na2HPO40.11%、 NaH2PO40.3%、柠檬酸钠0.43%、MgSO40.04%、MnSO40.012%、吐温-800.1%、L-半胱氨酸盐酸盐0.05%。并确定优化培养基的初始pH7.0,37℃C的厌氧培养,以2%的接种量接种,静态培养培养12h后,乳双歧杆菌V9的活菌数为6.38×109CFU/mL,比相同条件下使用TPY培养基培养的活菌数(2.26×109CFU/mL)提高了2.8倍。(2)在得到最优培养基与静态培养条件后,再对有可能影响发酵结果的恒pH值、中和剂种类、搅拌速度以及厌氧环境等因素的优化,最终确定最优的高密度发酵工艺为：发酵温度为37℃,混合气体(N2：H2：C02=80：10：10),发酵恒pH值为5.9,中和剂为25%的氨水,转速80rpm。在此条件下,乳双歧杆菌V9经过高密度发酵培养后,发酵液的活菌数可达到8.9×109CFU/mL,发酵时间为6.3-7.5h,与静态培养相比较,活菌数提高了39%,发酵时间缩短了3-4h。
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