转PPA基因小麦后代分析

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小麦是世界上重要的粮食作物,在我国各地也广泛种植。经过多年的不断发展,小麦产量已经有了很大的提高。然而近年来不断爆发的蚜虫危害,也使得小麦产量和品质大大降低。传统治理蚜虫的方法主要是化学农药防治,而大面积喷施化学农药不仅对生态环境造成了严重的破坏,也威胁到了我们自己的健康。所以,加强抗蚜小麦育种显得尤为重要。本实验通过转基因方法,将PPA基因转入小麦石-4185,成功获得了含有PPA基因的转基因植株。PCR方法对小麦纯合体进行了鉴定。通过RT-PCR技术、Southern杂交技术以及TAIL-PCR技术对目的基因的转录及整合情况进行了探究。此外,转基因植株叶绿体DNA和RNA水平的目的基因表达分析,为进一步对目的基因进行亚细胞定位提供了帮助。最后,通过室内及大田抗蚜生理鉴定,对转基因小麦的抗蚜表型进行了切实研究。通过对T5代转基因纯合体进行DNA水平鉴定,表明目的基因在T5代的小麦植株中仍然稳定存在;RT-PCR的检测结果表明转基因植株内目的基因在RNA水平可以稳定的转录表达;TAIL-PCR结果表明目的基因在受体植物中仍以环状的形式存在,这恰恰是Southern杂交并没有得到理想结果的原因所在。对转基因植株叶绿体DNA以及RNA水平的分析,表明目的基因极有可能在叶绿体中存在表达。小麦抗虫实验表明,转基因小麦能有效防止蚜虫的大量繁殖。
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