【摘 要】
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目的:观察电针心包经穴对大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型大鼠的神经功能缺损、脑梗死体积及梗死脑组织中NR1/NR2A/NR2B表达的影响,以探讨电针促进神经修复的作用机制,为临床上应用电针心包经穴治疗脑梗死（ischemic stroke,IS）提供理论和实验依据。方法:将180只SD大鼠完全随机分为正常组60只,需要造模的120只。
【基金项目】
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国家自然科学基金项目:基于D-Ser对NMDAR门控离子通道的调控探讨电针心包经穴促MCAO大鼠神经修复的机制研究（课题编号:81774421）； 湖南省自然科学基金项目:D-丝氨酸在电针心包经穴促MCAO大鼠神经修复中对NMDAR 的调节作用及机制研究（课题编号:2018JJ2306）； 湖南中医药大学校级科研基金项目:
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目的:观察电针心包经穴对大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型大鼠的神经功能缺损、脑梗死体积及梗死脑组织中NR1/NR2A/NR2B表达的影响,以探讨电针促进神经修复的作用机制,为临床上应用电针心包经穴治疗脑梗死（ischemic stroke,IS）提供理论和实验依据。方法:将180只SD大鼠完全随机分为正常组60只,需要造模的120只。采用改良线栓法制备MCAO大鼠模型,造模成功后,将MCAO大鼠完全随机分为模型组60只、电针组60只。最后将三组中的大鼠,按时相点（1天,3天,7天,14天,21天）,完全随机分成五个亚组,每亚组12只;造模24h后开始干预,电针组取天泉、曲泽、内关、大陵穴针刺后连接电针仪30min,正常组、模型组在与电针组同等条件下抓取、束缚大鼠30min,每天1次,连续治疗相应亚组天数;在首次操作干预前及最后一次干预后,参照孙敬芳的行为学评分标准,对大鼠进行评分;干预相应亚组天数后,处死取材,运用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenytetrazoliumchloride,TTC）染色测定脑梗死病灶体积,运用免疫蛋白印迹法（western blot,WB）检测脑梗死组织中NR1/NR2A/NR2B的蛋白水平。结果:1.行为学评分:（1）与正常组处理前比,电针组、模型组均有统计学意义（p<0.05）;与模型组处理前比,电针组各时相点差异无统计学意义（p>0.05）。（2）同一时相点,处理前后比较:正常组,各时相点差异均无统计学意义（p>0.05）;模型组,仅21天亚组处理后评分降低（p<0.05）;电针组3天、7天、14天、21天亚组处理后评分明显降低（p<0.05）。（3）处理后同一时相点,与模型组相比,电针组3天、7天、14天、21天亚组评分均降低（p<0.05）。提示MCAO大鼠具有一定自我修复能力,且电针心包经穴在改善大鼠行为障碍上,明显优于模型组。2.脑梗死体积:同一时相点,（1）与正常组比,模型组、电针组在1d、3d、7d、14d、21d均高于正常组（p<0.05）,提示造模成功。（2）与模型组比,电针组在1d、3d差异无统计学意义（p>0.05）,在7d、14d、21d降低（p<0.05）,表明电针可促进脑梗死体积缩小。3.NR1/NR2A/NR2B蛋白含量:⑴NR1蛋白含量:同一时相点,（1）与正常比,模型组在1d、3d、7d、14d、21d表达升高（p<0.05）;电针组,1d、7d、14d、21d表达升高（p<0.05）,在3d表达升高,但差异无统计学意义（p>0.05）。（2）与模型组比,电针组在1d、3d、7d、14d、21d表达均低于模型组（p<0.05）。表明大鼠脑缺血后会促进NR1表达,予以电针干预可抑制其表达。⑵NR2A蛋白含量:同一时相点,（1）与正常组比,模型组在3d时升高（p<0.05）,14d、21d降低（p<0.05）。电针组在1d、3d、7d是降低（p<0.05）,在14d时差异无统计学意义（p>0.05）,在21d升高（p<0.05）。（2）与模型组比,电针组在1d、3d、7d均降低（p<0.05）,在14d、21d升高（p<0.05）。表明MCAO大鼠缺血脑组织中NR2A表达呈先上升,后下降的变化趋势。予以电针干预在脑缺血早期可降低NR2A蛋白含量。在中后期升高其蛋白含量。⑶NR2B蛋白含量:同一时相点,（1）与正常组比,模型组在1d、3d、7d升高（p<0.05）,在14、21d下降（p<0.05）;电针组在1d差异无统计学意义（p>0.05）,3d升高（p<0.05）,7d降低（p<0.05）,14d、21d升高（p<0.05）。（2）与模型组比,电针组在1d、3d、7d低于模型组（p<0.05）,在14d、21d高于模型组（p<0.05）。表明MCAO大鼠缺血脑组织中NR2B表达呈先上升,后下降的变化趋势。予以电针干预在脑缺血早期可抑制NR2B表达,在中后期促进其表达。结论:1.电针心包经天泉、曲泽、内关、大陵穴,能改善MCAO大鼠运动功能,缩小脑梗死体积。2.电针改善MCAO大鼠运动功能及缩小脑梗死体积的机制,可能是在脑缺血早期抑制NR1/NR2A/NR2B的表达,在脑缺血中后期抑制NR1表达,同时促进NR2A/NR2B的表达,从而激活神经细胞存活相关通路,修复受损的神经细胞,改善神经功能。
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