【摘 要】
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鳜鱼(Chinese perch,Siniperca chuatsi)俗称鳜花鱼、季花鱼、桂花鱼、桂鱼、鯚鱼,属鲈形目,鮨科,鳜亚科,鳜属(Basilewsky)。鳜鱼广泛分布于中国东部平原的江河湖泊。分离鳜鱼脑组织,提取并纯化脑总RNA,通过逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)分别扩增出NPY基因cDNA核心片段,并应用3’RACE和5’RACE扩增NPY基因cDNA 3’末端及5’末端,最后
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鳜鱼(Chinese perch,Siniperca chuatsi)俗称鳜花鱼、季花鱼、桂花鱼、桂鱼、鯚鱼,属鲈形目,鮨科,鳜亚科,鳜属(Basilewsky)。鳜鱼广泛分布于中国东部平原的江河湖泊。分离鳜鱼脑组织,提取并纯化脑总RNA,通过逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)分别扩增出NPY基因cDNA核心片段,并应用3’RACE和5’RACE扩增NPY基因cDNA 3’末端及5’末端,最后通过序列拼接获得鳜鱼NPY基因cDNA全序列。序列分析结果表明,鳜鱼NPY基因cDNA全长704 bp,包含一个58 bp的5’非翻译区(5’-UTR);一个346 bp的3’非翻译区(3’-UTR)以及一个长300 bp的开放阅读框(ORF),编码99个氨基酸的prepro-NPY。从其prepro-NPY序列可以推测出它包括一个由28个氨基酸组成的信号肽,一个由36个氨基酸组成的NPY,3个翻译后加工的氨基酸(Gly-Lys-Arg)和由一个35个氨基酸组成的C端侧翼肽段。鳜鱼与其它棘刺鱼类(acanthomorph fishes)的prepro-NPY有高度同源性(93-95%);与鲤鱼类(59-60%)或人类(57-63%)的同源性较低。鳜鱼NPY基因编码四个外显子及三个内含子。将鳜鱼NPY基因第二个内含子(1130 bp)与第三个内含子(78 bp)长度之比将为14,但在斑马鱼或脊椎动物的NPY基因第二个内含子与第三个内含子长度之比一般少于4。脊椎动物如人类、田鼠及鸡的NPY基因总长一般保持在8 kb左右,鳜鱼NPY基因全长2223 bp,约为脊椎动物NPY基因全长28%。分析鳜鱼基因全长1622 bp上游启动区,一个典型的TATA box、GC box和一个不典型的CAAT box组成,分别位于启动子上游的81 bp、101 bp及303 bp处。在启动子上游的1388 bp、1456 bp及1579 bp处找到3个与ob基因有关序列(STATbinding site),起始结合位点样组件(STAT binding site-like elements)(TCCAGTA)对小鼠NPY基因调控瘦素的翻译及表达、以及神经中枢的调控例如食物的吸收是必需的。半定量RT-PCR法检测鳜鱼NPY基因mRNA在6个组织中的表达情况,结果在鳜鱼脑部NPY mRNA有大量表达,其次为脾脏及肝脏,在神经组织、肠及肌肉表达较少。这些结果表明鳜鱼可能被瘦素及皮质醇介导其食欲调节。
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