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目的:评价高危型HPV基因型检测在宫颈癌筛查中的可行性及应用价值。P16/Ki-67细胞学双染在HPV阳性、宫颈不同病变脱落细胞中的表达和意义。探讨新疆地区感染HPV16变异体谱系分布及E6、E7、LCR基因突变研究,分析HPV16变异体在宫颈癌及癌前病变发生发展中的作用。方法:应用高危型HPV基因检测系统,对2014年09月~2015年8月在新疆自治区人民医院住院及门诊就诊行HC2、TCT检测、并有病理结果的564位女性的宫颈细胞标本进行HPV基因型检测,对其中59例HC2阳性患者的液基细胞学涂片用免疫细胞化学法检测P16/Ki-67蛋白在宫颈脱落细胞中的表达。对HPV16阳性的宫颈癌及癌前病变患者,提取基因组DNA,利用PCR扩增HPV16 DNA E6、E7基因及LCR区核苷酸片段,正反向测序。与HPV16基因序列分析比对,确定HPV16谱系分布,分析核苷酸突变位点。结果:(1)高危型HPV基因型检测在诊断CIN2+病变时优于HC2、TCT、Hybr Miax分型检测,差异具有统计学意义(P<0.05),不同液基细胞学分级及组织病理分级中HR-HPV感染率不同,差异具有统计学意义(P<0.05),随细胞学及病理学诊断级别升高,HR-HPV感染率上升(P<0.05),HPV16型感染率上升(P<0.05)。各级别宫颈病变以HPV16型及合并HPV16型感染为主,HP16型分布在维吾尔族和汉族妇女之间无统计学差异(P>0.05)。各年龄段高危型HPV的构成比无统计学差异(P>0.05)。高危型HPV基因型检测对ASCUS分流优于HC2。(2)P16/Ki-67细胞学双染检测诊断CIN2+病变时具有高灵敏度(92%)和总符合率(78%),P16/Ki-67细胞学双染检测与组织病理学结果符合率较一致(Kappa=0.569,P<0.05),在对ASCUS/ASC-H进行P16/Ki-67细胞学双染检测更能发现宫颈高级别病变(P<0.05),不同宫颈病变P16/Ki-67细胞学双染检测阳性率:炎症39.13%(9/23)CIN1 20%(2/10),CIN2-3 91.30%(21/23),宫颈癌100%(2/2)差异具有统计学意义(P<0.05),随病变程度的加重,P16/Ki-67细胞学双染阳性率呈上升的趋势。(3)E6基因突变率为80.00%(92/115)主要突变位点T350G(58.78%),T178G(18.47%),E7突变率为54.78%(63/115)主要突变位点A647G(33.33%),T846C(26.98%),LCR突变率为23.48%(27/115),主要突变位点为C24T(74.07%),C13T(25.92%)。维吾尔族妇女与汉族妇女之间比较,维吾尔族T350G突变率显著高于汉族,汉族A647G、T846C、C24T突变率显著高于维吾尔族,差异具有统计学意义(P<0.05)。维吾尔族宫颈癌组T350G突变率显著高于炎症组(P<0.05),且随病变严重程度增加突变率上升,汉族T350G、A647G、T846C、C24T突变率炎症组、宫颈病变组显著高于宫颈癌组(P<0.05),维吾尔族C24T突变率炎症组显著高于宫颈癌组(P<0.05),差异均具有统计学意义(P<0.05)。新疆汉族人中感染的HPV16主要为亚洲型,新疆维吾尔族感染的HPV16主要为欧洲型。结论:高危型HPV感染是宫颈癌前病变和宫颈癌的主要致病因素;宫颈各级别病变中以HPV16型及合并HPV16型感染为主;随细胞学及病理学诊断级别升高HR-HPV感染率上升;高危型HPV基因型检测对ASCUS诊断分流优于HC2。P16/Ki-67细胞学双染阳性率随着宫颈病变程度加重呈上升趋势;P16/Ki-67细胞学双染检测可以有效对ASCUS及HPV阳性者进行诊断分流,具有临床应用价值。HPV16E6、E7突变可能与宫颈病变进展有关,T350G突变可能是维吾尔族宫颈癌高发的原因之一;新疆汉族人中感染的HPV16型主要为亚洲型,新疆维吾尔族感染的HPV16型主要为欧洲型。