彝药“大麻药”的抗肿瘤药效物质基础与炮制机理研究

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彝医药是彝族人民经过长期实践逐渐建立和完善的少数民族传统医药学。近年来,彝药以其较为完整的医药理论体系和丰富的临床实践经验迅速崛起,尤其在产业化方面的发展较为突出,目前彝医药产业规模在我国少数民族药业中名列前茅。民族药的研究既是热点也是难点,只有深入对民族药药效物质基础和炮制机理的研究才能加快民族药现代化的进程。  大麻药(Radix Dolichosae)俗称“麻里麻”、“麻三段”,原植物系豆科扁豆属镰扁豆(Dolichos falcatus Kalcatus Klein),药用部位为根部,是云贵地区常用的一种药材,有祛风活血、镇咳平喘等功效。现代药理研究表明大麻药具有抗肿瘤和抗炎、镇痛活性。其化学成分主要为皂苷、多糖和生物碱等。  传统药物(包括中药和民族药)药效物质基础和炮制机理研究是其现代化研究中的重点和难点。药效物质基础主要指的是传统药物的有效成分群,由于传统药物的化学成分多样和药理作用靶点复杂等特点,需要从化学分析和药理活性等方面研究才能科学地阐明其药效物质基础。这对研究药物的作用机制和建立质控标准是非常重要的。“减毒增(存)效”是传统药物的主要炮制目的,因此,采用天然药物化学、药理学和毒理学等技术手段探讨其炮制前后药物的化学成分和药理活性和毒性的变化规律对于科学阐释传统药物的炮制机理显得非常重要,这也是民族药物炮制研究中的核心内容。  为了研究大麻药的药效物质基础,本文从化学成分和药理作用两方面的角度出发,以大麻药为研究载体,大麻药的几种提取物为研究对象,进行了从提取分离、含量测定、结构分析最后到体内外药理活性的药效物质基础研究,同时还探讨了姜制或麸炒两种炮制方法对大麻药总皂苷成分含量变化及药理活性的影响,对大麻药炮制机理中的药理活性方面进行初步探讨,主要研究内容和成果如下:  1、采用比色法测定大麻药及水提物和总皂苷中皂苷成分的含量,发现大麻药富含皂苷类成分,多糖成分含量较少,约为皂苷含量的1/10。随后用气相色谱法分析了大麻药多糖的单糖组成,结果显示:大麻药多糖成分中单糖的组分主要为鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、阿洛糖和半乳糖等六种,质量分数依次为15.86%、20.37%、6.62%、14.24%、8.38%和14.15%。  2、对大麻药各提取物的体内外抗肿瘤活性进行了系统地评价:首先采用MTT法测定大麻药各提取物对人肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用,发现大麻药总皂苷的细胞增殖抑制率最高,水提物其次,且两者有良好的量效关系,多糖的体外抗肿瘤活性低于总皂苷和水提物,大麻药苷A对HepG2细胞的生长抑制作用非常微弱。其次采用H22荷瘤小鼠模型研究大麻药各提取物的体内抗肿瘤活性和一般毒性,结果显示大麻药总皂苷的体内抗肿瘤活性最佳,水提物和多糖其次;总皂苷和水提物对H22荷瘤小鼠的血液系统、免疫系统和肝、肾功能无明显毒性,多糖对免疫功能有一定的调节作用。  3、研究了大麻药总皂苷和多糖的免疫调节作用,选择了正常小鼠模型和环磷酰胺诱导免疫功能低下的小鼠模型,用碳粒廓清实验讨论了总皂苷和多糖对小鼠的非特异性免疫功能的影响。实验结果表明大麻药多糖和总皂苷均能增强正常小鼠的免疫功能,并一定程度上恢复免疫低下小鼠降低的免疫器官指数,多糖的提高免疫作用强于总皂苷。  4、分别采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型、扭体法和热板法研究大麻药总皂苷的抗炎、镇痛活性,结果显示:大麻药总皂苷能减轻二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀炎症;能降低冰醋酸引起的痛反应(小鼠扭体次数)和提高小鼠在热板上的痛阈值(舔后足时间),且有较好的剂量依赖性,说明大麻药总皂苷有显著的抗炎、镇痛活性。  5、通过分析和评价大麻药在姜制或麸炒两种炮制方法处理后,其总皂苷的含量和药理活性变化,研究炮制对其药理作用和药效物质基础的影响。实验结果显示,大麻药经过姜制或麸炒炮制后其总皂苷的含量均有所升高;并且其体内、外抗肿瘤活性、免疫增强作用和抗炎、镇痛活性均有所增加;其中,麸制品总皂苷的活性增加程度大于姜制品,说明这两种炮制方法是通过增加大麻药的总皂苷成分而发挥增强其抗肿瘤和抗炎、镇痛作用。  通过对大麻药的抗肿瘤药效物质基础研究,本文确定了大麻药抗肿瘤作用的主要药效物质基础是总皂苷成分;同时,通过研究大麻药经姜制和麸炒两种炮制处理前后的化学成分、药理活性的变化,初步探讨了大麻药姜制和麸炒的炮制机理。
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