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背景和目的：大多数实体肿瘤的生长都依赖新生血管的支持，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在肿瘤的血管生成中居中心地位，而flk-1（fetal liver kinase 1）是VEGF发挥作用的关键。阻断VEGF与flk-1的接合可望达到抑制肿瘤生长的目的。我们制备抗肿瘤血管生成口服DNA疫苗pcDNA3.1+／flk-1（n1-7），研究该疫苗抗C57BL／6J小鼠胃癌生长和转移的作用，并探讨其可能的作用机制。 方法：1．提取C57BL／6J胎鼠总RNA，采用RT-PCR技术扩增出VEGFR2胞外cDNA全长序列flk-1（n1-7），以质粒pcDNA3.1（+）为载体，构建成重组质粒pcDNA3.1+／flk-1（n1-7），经脂质体介导将其转染COS-7细胞，并用Western blot方法检测其蛋白表达。2．将pcDNA3.1+／flk-1（n1-7）转化感受态减毒沙门氏菌SL3261，制备成以SL3261为载体的口服DNA疫苗。3．将小鼠分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组，两周内各口服接种三次后，用MFC细胞建立胃癌皮下动物模型，观察小鼠的中位生存期。4．将小鼠分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组，两周内各口服接种三次后，用MFC细胞建立胃癌皮下动物模型；流式细胞仪分别于接种疫苗前、接种疫苗后、接种MFC细胞后测血液CD3+值和CD8+值；接种MFC细胞28天后处死全部小鼠，取出肿瘤，称重，测体积，免疫组织化学法计数肿瘤微血管密度，观察疫苗对小鼠MFC细胞皮下肿瘤的抑制作用。5．将小鼠分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组，两周内各口服接种三次后，从胃前壁浆膜下接种MFC细胞，建立胃癌肝脏转移动物模型；记录小鼠的体重变化；流式细胞仪分别于接种疫苗前、接种疫苗后、接种MFC细胞后测血液CD44v值；接种MFC细胞20天后处死全部小鼠，取出肝脏和胃，称重，测体积，病理学检查，体视学计数肝脏肿瘤转移灶个数，观察疫苗对小鼠肝转移的抑制情况。6．将小鼠分为疫苗组，空质粒组和生理盐水组，用MFC细胞建立胃癌皮下动物模型，然后再口服接种疫苗，观察小鼠肿瘤生长情况及中位生存期。