【摘 要】
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α-取代的γ-丁内醋在食品、药品和农药工业中具有重要的应用价值。大多数内酯化合物具有手性,其生理活性通常取决于分子的绝对构型。本课题以α-溴-γ-丁内酯为研究对象,从
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α-取代的γ-丁内醋在食品、药品和农药工业中具有重要的应用价值。大多数内酯化合物具有手性,其生理活性通常取决于分子的绝对构型。本课题以α-溴-γ-丁内酯为研究对象,从土壤及实验室现有的菌株中筛选得到了一株具有一定立体选择性水解活性的产内酯酶菌株,将其命名为Rhodotorula mucilaginosa ZQ012。并对该菌株的发酵条件和转化条件进行了优化。课题还以商品化脂肪酶作为生物催化剂,研究了其对α-溴-γ-丁内酯的选择性酯化反应。利用单因素实验对菌株R.mucilaginosa ZQ012进行发酵条件的优化,确定该菌株的最佳发酵条件为:麦芽糖1%,蛋白胨1%,NaC11%,KH2PO40.1%,K2HPO4·3H2O0.3%,MgS04 5mM/L,发酵液初始 pH为7.5,恒温摇床转速200 rmp,温度30℃,培养48 h;优化后底物e.e%从初始的33.4%增加到57.0%,提高了将近1倍,此时的转化率为 58.6%,E 为 4.0。接着,考察了菌株 R.mucilaginosaZQ012水解酶动力学拆分α-溴-γ-丁内酯反应条件,最佳的转化条件为:10mL转化体系,环己烷25%(V/V),乙酸乙酯 25%(Ⅴ/Ⅴ),0.1MpH8.0 磷酸缓冲液 50%(V/V),α-溴-γ-丁内酯1%(Ⅴ/Ⅴ),恒温水浴摇床转速200rmp,温度30℃,转化6h。e.e%从57.0%提高到84.4%,转化率几乎不变,保持在58.6%左右,E为15.5。最后,通过筛选商品化脂肪酶,研究了 α-溴-γ-丁内酯的选择性酯化反应。结果表明,当以嗜热lαnuginosus脂肪酶(TLIM)作为生物催化剂,以异辛烷做溶剂,催化正丙醇与(R,S)-α-溴-γ-丁内酯的选择性酯化的最优条件为:底物浓度为0.5%,水含量为2μL/mL,温度为30℃,摇床转速为200rmp,反应时间36h。在此条件下,底物α-溴-γ-丁内酯e.e.为29.3%,此时的转化率为51.1%,E为1.0。
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