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目的： 1)在细胞水平观察超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）对小动脉平滑肌细胞（Arteriolar smooth muscle cells，ASMCs）静息膜电位（Em）的影响，以及NO引起的ASMCs膜电位变化后SOD的作用。 2)在组织水平观察SOD治疗失血性休克后肌肉组织（脊斜肌）氧分布（分压）的变化。 3)在整体水平观察SOD对重症失血性休克的治疗作用，以及对血管反应性和升压药物效应的影响。 第一部分 SOD对ASMC膜电位的影响 方法： 用酶消化法快速分离正常以及失血性休克大鼠的ASMC，用膜电位敏感荧光探针DiBAC4（3）和激光共聚焦显微镜测定ASMC膜电位变化。实验分为三组：（1）假手术后分离ASMC+SOD组，（2）失血性休克后ASMC+SOD组，（3）SNAP（NO供体）处理ASMC+SOD组。 结果： SOD对正常ASMCs膜电位无显著影响；SOD使重症HS 2h后ASMC膜电位的超极化有部分恢复；SOD对SNAP引起的ASMCs膜电位超级化有部分逆转作用。 第二部分 SOD对重症HS大鼠脊斜肌组织O2分压的影响 方法： 将24只SD健康成年大鼠，体重190±10g，按Gray法暴露脊斜肌。动物随机分为4组（n=6）：假手术组、休克生理盐水治疗组、休克SOD治疗组，休克SOD加碱治疗组，用含磷荧光探针和PMOD2000组织氧测定计测定脊斜肌组织氧分压。 结果： 1、正常动物脊斜肌组织O2分压为33.3±4.9～35.9±6.1mmHg。 2、失血休克后各休克组动物脊斜肌组织O2分压迅速减至正常的50％，休克后2h降至20％，各休克组与假手术组比均有显著性差异（P＜0.01）。 3、复苏后：各休克组动物脊斜肌组织O2分压短暂恢复至接近正常水平。超氧化物歧化酶对重症失血性休克低血管反应性的治疗作用休克生理盐水组复苏0.5h后组织q分压再次降至休克初期水平，在复苏Zh后仍低于休克水平。休克SOD组组织q分压与休克生理盐水组组织q分压比较有所提高，但无统计学意义（P>0.05）。休克SOD+碱治疗组动物能较好维持组织O:分压，比休克生理盐水组有显著性提高（P<0.05），与假手术组比无显著性差异（P>0.05）。、.产、.少..︸勺‘Z吸了t第三部分SOD对重症失血性休克大鼠的治疗作用方法: 将28只SD大鼠（体重200士109）制作脊斜肌微循环观察标本，复制重症失血性休克模型。经股静脉注射实验药物，随机分为500治疗组、SOD+N aHCO3（SOD+碱）治疗组，NaHC03治疗组，生理盐水（NS）对照组。分别观察血管反应性、多巴胺升压反应、血压、微动脉血流量和24小时存活率。结果: 休克2小时后，微血管对去甲肾上腺素NE（加哪in印hrine）的反应性显著减低，NE闽值比失血前提高24一27倍。复苏治疗2小时后，用SOD、NaHC03、SOD+碱治疗后，血管反应性都有回升，其中以SOD+碱治疗组效果最显著，NE阐值下降至失血前的4.7倍。此外，给500十碱以后，再给多巴胺的升压效应最为显著，是生理盐水对照组的1.9倍，且在回输血液后动物血压稳定在loonunHg以上;治疗2h后，微动脉血流量是对照组的2.54倍，动物存活时间比盐水对照组延长2.9倍。结论:1、SOD能够减轻重症HS大鼠ASMCs超极化，对NO引起的细胞膜超 极化有部分逆转作用;2、在重症失血性休克后单纯恢复血容量治疗，2小时后脊斜肌组织。2 分压仍处于较低水平;SOD和碱治疗能够明显提高重症HS大鼠复 苏后脊斜肌组织02分压。3、在重症休克后期，血管对NE的反应性显著下降。sOD和5%NaHCO3 合用能够恢复血管对NE的反应性，提高多巴胺的升压效果、动物超氧化物歧化酶对重症失血性休克低血管反应性的治疗作用血压稳定在100nunHg以上，增加细动脉血流量以及提高动物存活率，提示SOD和碱联合使用可能是治疗重症失血性休克的一种新途径。