二至加祛瘀解毒方对肾虚血瘀型IVF-ET不孕患者卵泡液中ROS和颗粒细胞凋亡率的影响

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目的:通过实验观察,分析二至天癸方合祛瘀解毒方对肾虚血瘀型子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者卵泡液中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量、caspase-3蛋白量以及颗粒细胞凋亡率的影响,旨在深入研究补肾活血法对内异症引发不孕患者的临床疗效。通过实验观察,分析二至天癸方合祛瘀解毒方对肾虚血瘀型子宫内膜异位症(EMs)患者卵泡液中活性氧(ROS)含量、caspase-3蛋白量以及颗粒细胞凋亡率的影响,在中医“血瘀蕴毒”理论、西医氧化应激、西医细胞凋亡基础上,中西汇通,研究组方对EMs兼不孕症患者的治疗作用。方法:选择符合标准的EMs患者共计66位,随机分为两组,治疗组33例,服补肾活血中药,观察组33例,服桂枝茯苓丸颗粒。同时,选取33位同时期、仅因男方因素行IVF的患者作为对照组(无中药)。对比两组EMs病人用药前后肾虚血瘀证候评分的变化,对比中药治疗组、观察组、正常对照组患者的采卵数、受精率、优卵率、优质胚胎率、优质胚胎数,再对比化学发光及荧光法检测的卵泡液中ROS的含量及蛋白质印记法(Western-blot)检测的caspase-3蛋白(凋亡因子家族效应组成员之一)的含量及颗粒细胞凋亡率。结果:1.中药治疗组患者肾虚血瘀证候的变化、受精率、卵裂率、优质胚胎率、优质胚胎数明显优于观察组,有统计学意义。获得卵子数量和优胚数无统计学意义。2.IVF取卵日卵泡液中ROS水平与受精率、优卵率、优胚率均呈明显的负相关,卵泡液中caspase-3蛋白表达与受精率、优卵率、优胚率均为明显的负相关,颗粒细胞凋亡率与受精率、优卵率、优胚率均为明显的负相关。3.中药治疗组和正常对照组卵泡液中ROS水平、caspase-3蛋白表达和颗粒细胞凋亡率小于观察组,前两组之间差别较小。结论:1.补肾祛瘀解毒法对肾虚血瘀型IVF-ET周期EMs患者的不孕之症有积极作用,可体现在卵细胞质量、胚胎质量上。2.基于“血瘀瘀毒”理论,卵泡液中活性氧ROS的含量较高属中医“瘀毒”的范畴,二至天癸合祛瘀解毒方可减少“毒”(活性氧)的生成和抑制caspase-3的表达,较好地改善卵泡液的氧化应激状态,提高卵母细胞的质量。3二至天癸合祛淤解毒方可抑制caspase-3蛋白表达,减少凋亡信号的传导,降低颗粒细胞凋亡率,进而提高卵母细胞的质量,即影响卵巢的藏泄功能中“藏”的方面。
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