基于雌性纳精囊及内含物蛋白组学探讨Wolbachia诱导果蝇Cl的机制

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Wolbachia是广泛分布在昆虫体内的一类共生菌,能通过多种机制调节宿主的生殖方式,包括诱导宿主精卵细胞质不亲和(CI)、孤雌生殖、雌性化、杀雄等,其中Wolbachia引起的最普遍的是表型精卵细胞质不亲和,即感染Wolbachia的雄性与未感染或感染不同品系Wolbachia的雌性宿主交配后,受精卵不能正常发育,在胚胎期死亡。已有研究表明,Wolbachia在精子发生早期对精子进行了“修饰”,所以导致精子与正常卵子受精后,胚胎不能正常发育。为了找到导致Wolbachia感染的果蝇和正常果蝇中精子蛋白的差异,我们分别用1d和5d感染Wolbachia的雄蝇以及去除Wolbachia的雄性果蝇,分别与3d未感染的处女蝇交配2h后,解剖雌蝇,取出受精囊spermatheca和纳精囊seminal receptacle,提取蛋白。用iTRAQ标记,LTQ-Orbitrap XL检测。结果表明:标记效率为98.5%,共鉴定到1839种蛋白,定量到1338种蛋白。三种样品之间蛋白质量改变1.5倍以上的有307种。对所有改变的蛋白进行分析,在panther中发现与代谢相关的蛋白所占比例最高,为41.5%。这与基因芯片的结果一致,说明Wolbachia感染对宿主的代谢影响最大。有趣的是,在string中,这些表达差异较大的蛋白明显聚为四类,分别与生殖、能量代谢、蛋白代谢相关,还有一类功能未知。此外,我们还发现,很多雄附腺蛋白聚为一群,这说明雄附腺蛋白随着精液进入到雌体体内,而这些雄附腺蛋白与生殖活动密切相关。所以推测转运到雌体内的雄附腺蛋白量的差异可能是引起CI的重要原因。与能量代谢相关的这一类蛋白中,有很多的GTP、ATP酶类表达量发生了改变,这可能与能量代谢信号通路有关。与蛋白代谢相关的这一类蛋白中,有很多的核糖体相关的蛋白,可能与有丝分裂中中心体的活动有关。进一步的研究正在进行中。
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