论文部分内容阅读
目的:探讨体外联合应用VEGF和PDGF-BB两种细胞生长因子对骨髓间充质干细胞增殖及成血管不同阶段相关基因指标mRNA表达量的影响,为优化组织工程干细胞提供理论依据。方法:体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,根据分组:VEGF组、PDGF-BB组、VEGF+PDGF-BB组及对照组,分别用不同浓度VEGF(0、20、40、60、80、100、120 ng/mL)和PDGF-BB(0、20、40、60、80、100、120 ng/mL)单独或联合干预BMSCs,连续7天检测细胞增殖能力,确定最佳促细胞增值浓度。使用最佳促细胞增殖浓度,根据分组干预BMSCs 7天和14天后,提取RNA、逆转录、RT-PCR检测四组细胞Ang-1、Hif-1α、HGF、IGF成血管基因的表达量。结果:(1)加入生长因子后,细胞增殖能力明显提高,单独作用效果不如联合作用的效果,最佳浓度组组合为:80 ng/mL VEGF+80 ng/mL PDGF-BB。(2)mRNA表达水平,在第7天及第14天这两个检测点,除了对照组,其他三组Ang-1、Hif-1α、HGF、IGF基因指标的mRNA表达均明显上调,差异具有统计学意义(p<0.05)。其中,VEGF+PDGF-BB组促BMSCs成血管效果最为显著,差异具有统计学意义(p<0.05)。VEGF和PDGF-BB间存在交互作用。(3)成血管基因mRNA表达的变化。对照组的Hif-1α、HGF、Ang-1及IGF mRNA的表达在第14天均低于第7天。与对照组相比,单独或联合应用细胞生长因子处理组Hif-1α和HGF的表达在第14天时高于第7天,而Ang-1和IGF的表达在与14天时低于第7天。结论:体外实验结果证明,联合应用VEGF和PDGF-BB既能促进SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖,又能促进成血管基因的表达。