枯草芽孢杆菌WB600对不同浓度铅暴露鲫鱼的减毒效应

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枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB600平板涂布于含有不同浓度铅溶液的固体培养基中(每个浓度设置3个重复),过夜培养后进行计数。结果显示该菌株具有较高的铅耐受性,其最高耐受性为900 mg/L Pb。采用添加新鲜浓缩菌液的方式,添加枯草芽孢杆菌WB600至鱼用颗粒饲料中并使饲料中活菌水平最终达到10~9 CFU/g。以个体均匀的鲫鱼(Carassius auratus)为试验对象,随机设置8组,分别为Ⅰ组(空白对照组);Ⅱ组(益生菌对照组);益生菌治疗Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ组分别为0.05 mg/L Pb+WB600、0.5 mg/L Pb+WB600、1.0 mg/L Pb+WB600;铅暴露Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ组分别为0.05、0.5、1.0 mg/L Pb;每组3个重复。试验60天后,收集血液、脑、鳃、肝胰脏、躯干肾、肠道以及背部肌肉等组织,检测其铅含量指标、抗氧化酶活性指标、免疫相关指标以及观察肠道组织显微结构的变化。对比鲫鱼各组织铅蓄积量变化,我们发现枯草芽孢杆菌WB600可显著降低鲫鱼各组织的铅蓄积量,而随着铅浓度的提高,其对鲫鱼脑及肌肉的铅代谢影响逐渐减小。与对照组相比,益生菌阳性对照组鲫鱼肝胰脏及躯干肾超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原性谷胱甘肽(GSH)含量、总抗氧化能力(T-AOC)均显著提高,肝胰脏过氧化氢酶(CAT)活性降低,无显著差异,躯干肾过氧化氢酶(CAT)活性显著提高;血清免疫球蛋白(IgM)含量、溶菌酶(LZM)活力显著提高;近端肠及远端肠绒毛高度、宽度及肌层厚度均显著提高。在0.05 mg/L铅暴露下,与铅暴露组相比,益生菌治疗组鲫鱼肝胰脏及躯干肾SOD、CAT及GSH水平均显著提高,肝胰脏T-AOC水平提高不显著,躯干肾T-AOC水平提高显著;在0.5 mg/L铅暴露下,与铅暴露组相比,益生菌治疗组鲫鱼肝胰脏及躯干肾GSH含量,躯干肾SOD及CAT活性均显著提高,肝胰脏SOD、CAT、T-AOC及躯干肾T-AOC水平提高不显著;在1 mg/L铅暴露下,与铅暴露组相比,益生菌治疗组鲫鱼肝胰脏及躯干肾GSH、T-AOC水平均显著提高,躯干肾SOD、CAT活性显著提高,肝胰脏SOD、CAT活性提高不显著。在3种浓度铅暴露下,与铅暴露组相比,益生菌治疗组鲫鱼血清免疫球蛋白(IgM)含量、溶菌酶(LZM)活力及氨基乙酰丙酸脱水酶(ALAD)活力均不同程度提高;其中,Ⅷ组IgM含量显著高于Ⅶ组,Ⅳ组LZM活性显著高于Ⅲ组,Ⅵ组ALAD活性显著高于Ⅴ组;与铅暴露组相比,益生菌治疗组鲫鱼远端肠及近端肠的绒毛高度、高度及肌层厚度均有不同程度增加,且具有较好的绒毛完整性,其中,远端肠绒毛高度、及肌层厚度有显著差异。由此可见,长期处于不同浓度铅暴露下,饲喂枯草芽孢杆菌WB600对鲫鱼抗氧化酶活力、免疫相关指标及肠道结构均有积极影响,从而可以缓解铅对鲫鱼机体造成的毒性作用。
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