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目的肺癌的发病率和死亡率在所有恶性肿瘤中均居首位,而经淋巴道转移是肺癌进展的重要标志,也是制定治疗方案、判断预后的重要因素。本研究旨在探讨趋化因子及其受体SDF-1/CXCR4轴和Notch1信号通路在肺癌淋巴管新生中的作用及可能的机制。研究方法本研究共包括三个方面:第一部分,选取2010年1月-2012年12月间在南京军区南京总医院行肺癌根治术、术后病理提示为肺腺癌(I-IIIA)的165例患者,查询记录患者临床信息,制作肿瘤组织石蜡切片并使用免疫组织化学的方法对人肺腺癌组织中的CXCR4与Notch1进行染色,分析CXCR4与Notch1的表达与患者的临床参数(如年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结是否转移等)、术后总体生存率、以及肿瘤组织内血管密度和淋巴管密度的关系;第二部分,通过构建shRNA慢病毒质粒,体外抑制淋巴管内皮细胞(LEC)中CXCR4和Notch1的表达,使用qPCR分析其对相关基因mRNA水平的影响,以及对LEC在Fibrin凝胶微珠(FiBA)体外模型中形成新生淋巴管的影响;第三部分为体内实验,使用了稳定抑制CXCR4或Notch1的Lewis肺癌(LLC)细胞建立小鼠Lewis肺癌模型,以研究阻断CXCR4或Notch1对小鼠Lewis肺癌肿瘤生长和肿瘤淋巴管密度的影响。结果人肺腺癌组织共表达CXCR4/Notch1与肺癌淋巴结转移及术后较差的预后相关,而且这种相关性可能与其促进血管、淋巴管新生有关。在LEC细胞中阻断CXCR4可下调Notch1及其下游基因的表达水平,进而影响淋巴管生成。虽然阻断CXCR4或Notch1对VEGFR3无明显直接影响,但却能上调sVEGFR3的表达,竞争性抑制VEGFR3的活性,从而间接影响淋巴管生成。而且同时阻断CXCR4和Notch1对Notch1下游基因及sVEGFR3的影响更为显著,对淋巴管生成的影响也更明显。阻断CXCR4或Notch1均可以抑制小鼠Lewis肺癌肿瘤的生长、降低肿瘤组织内的淋巴管密度。而同时阻断CXCR4和Notch1对小鼠Lewis肺癌肿瘤的生长和淋巴管密度的影响更显著。结论CXCR4既可直接调控Notch1及其下游基因的表达,以调节肺癌组织淋巴管新生;亦可与Notch1共同影响sVEGFR3的表达,竞争性抑制VEGFR3通路,以间接调节肺癌淋巴管新生。同时阻断CXCR4/Notch1能明显抑制肺癌的生长和肿瘤组织内的淋巴管新生,为肺癌抗淋巴管生成治疗提供了一个全新的思路。