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雄性特异性抗原(male-specific antigen)通常也称为雄性特异性弱组织相容性Y抗原(male-specific minor histocompatibility Y antigen),是一组雄性特异性表达的基因的产物,由Eichwald和Silmser在1955年首次发现.其在异性间组织移植的排斥反应、性别分化及性别控制方面的研究中具有重要的理论和实践意义.该研究采用高度近交的纯系BALA/C小鼠作为动物模型,利用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridizaion),构建小鼠大脑组织雄性特异性抗原的cDNA文库,首次从雄性和雌性哺乳动物基因差异表达的角度来研究雄性特异性抗原.实验分别提取雄性和雌性BALA/C小鼠大脑组织总RNA,纯化出mRNA.以雄性小鼠为Tester组,以雌性小鼠为Driver组,利用抑制性差减杂交技术得到小鼠大脑组织雄性特异性基因cDNA.将cDNA与pGEM-T载体连接转化大肠杆菌JM109,构建抑制性差减cDNA文库.从构建的cDNA文库中随机挑取160个克隆,对其进行PCR扩增进行鉴定,共获得134个阳性克隆,阳性率为83.7％,对阳性克隆以T7和SP6为引物进行PCR扩增,显示插入的片段大小分布在0.2-0.8kb之间.对其中的80个克隆进行测序,并进入Genebank数据库进行了Blastn序列分析.其中有3条为未知序列,77条为已知序列.将3条未知的序列进入小鼠基因组数据库进行同源性分析,发现这3条序列都已测序,皆位于第6号染色体上.结果表明,该实验成功的构建了小鼠大脑组织雄性特异性抗原cDNA文库,这为研究雄性特异性抗原提供了一个新的研究思路和研究平台.这在研究异性间组织移植的排斥反应、性别分化及性别控制方面的研究中具有重要的理论意义.