中红侧沟茧蜂清道夫受体的功能研究

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中红侧沟茧蜂(Micropilits mediator)是一种昆虫内寄生蜂,其寄主涉及多种鳞翅目昆虫,包括棉铃虫(Helicoverpa armigera)、粘虫(Pseudaletia separate)和甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)等重要农业害虫,在害虫生物防治上效果显著。清道夫受体(scavenger receptors, SCRs)是细胞表面的一类跨膜糖蛋白,参与识别多种病原体。中红侧沟茧蜂有13个清道夫受体基因,研究其功能,为更好地保护和利用天敌昆虫奠定基础。  本研究通过系统进化分析,确定MmSCRs与其他物种进化关系,并运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测MmSCRs基因mRNA在中红侧沟茧蜂在不同发育时期,以及感染细菌后的表达水平,通过RNA干扰技术,探究MmSCRA-1和MmCD36-1的功能。主要结果如下:  (1)中红侧沟茧蜂SCR基因家族共有13个成员,包括3种类型:A型4个,B型8个,C型1个。  (2)在中红侧沟茧蜂不同发育时期,MmSCRA-1基因mRNA的表达水平较高;感染革兰氏阳性菌藤黄微球菌(Micrococcus luteus)和革兰氏阴性菌阴沟肠杆菌(Enterobacter colacae)后,MmCD36-1基因mRNA的表达水平升高。  (3)中红侧沟茧蜂蛹期3日龄注射dsRNA后,dsSCRA-1注射组羽化率显著低于dsGFP注射组(P<0.05);蛹期3.5日龄注射dsRNA后,dsSCRA-1注射组羽化率仍显著低于dsGFP注射组(P<0.05)。  (4)干扰MmCD36-1基因后,中红侧沟茧蜂存活率与对照组无显著差异。干扰后感染藤黄微球菌,中红侧沟茧蜂存活率与对照组无显著差异,而干扰后感染阴沟肠杆菌,中红侧沟茧蜂存活率与对照组有极显著差异(P<0.001)。  (5)干扰MmCD36-1基因后感染藤黄微球菌,24 h内中红侧沟茧蜂体内菌落数显著多于对照组(P<0.05);干扰MmCD36-1基因后感染阴沟肠杆菌,18 h内中红侧沟茧蜂体内菌落数逐渐增多,与对照组有显著差异(P<0.01)。  综上所述,我们的结果表明,MmSCRA-1基因在中红侧沟茧蜂蛹期发育过程中起到关键作用;MmCD36-1基因参与中红侧沟茧蜂清除细菌的过程,帮助寄生蜂抵御细菌入侵。
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