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艾滋病的全称为获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)，是一类由人免疫缺陷病毒引起的疾病。nef基因是一种灵长类慢病毒(HIV-1，HIV-2，SIV)所特有的基因，它编码一种25到34kDa的十四酰膜相关蛋白。Nef对病毒的高水平复制及保持完整的致病性有极重要的作用。关于Nef如何作用的机制，至今仍未完全搞清楚，但近年来对它的研究有很大进展，有大量的报道从多方面揭示了它的功能及机制。Nef对病毒复制及感染效率的正性作用与病毒本身因素有关，也与宿主细胞因素有关。对于病毒，Nef可以提高病毒子的侵袭性以及逆转录酶的活性，对于细胞，Nef通过下调细胞表面一系列受体的水平来改变T细胞的信号转导并影响一些特异细胞因子的表达量，以便达到既提高病毒复制速度，又降低被感染细胞免疫学功能的目的。本课题旨在研究nef基因表达抑制对HIV病毒致病性的影响，主要包括以下研究内容在。 构建nef基因和荧光素基因融合表达载体并转染hela细胞系，通过观察荧光蛋白的表达情况检测转染效率和nef蛋白在hela细胞中的表达情况。针对nef基因的三段DNA序列分别构建3个shRNA干扰载体以表达对应的siRNA。将RNA干扰载体与nef表达载体共同转染hela细胞系。通过RT-PCR和Western方法检测转染RNA干扰载体前后nef表达的差异。 选择干扰效果较好的RNA干扰片段构建病毒载体。将病毒载体转染包装细胞tt67产生包装病毒。分别单独用SIV病毒和同时用包装病毒与SIV病毒感染CEMx174细胞。通过RT-PCR和Western方法检测转染包装病毒对nef基因表达的干扰效果。 实验结果表明，shRNA在转染的hela细胞中对nef基因的表达有明显的抑制作用。nef干扰载体shRNA转染淋巴细胞可以抑制SIV病毒复制。初步说明可以用RNAi技术干扰SIV病毒nef基因的表达以抑制该病毒的复制和降低其致病性。