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苹果多倍体具有树势强旺、抗性强、果实大、高产、无籽或少籽等优点,因此,多倍体育种一直是苹果育种的一个重要目标。本研究建立了三倍体苹果品种乔纳金的适宜的成熟胚离体培养体系,高比例地获得了多倍体资源,并分析了乔纳金苹果实生后代中三倍体的产生途径。主要结果如下:
1.比较了不同基本培养基配方和附加成分的作用,成功地建立了乔纳金的成熟胚离体培养体系。适宜的培养基为:F14+活性炭1 g/L+水解乳蛋白400 mg/L+抗坏血酸100mg/L+蔗糖15 g/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂6 g/L。在温度为25±2℃,光周期为14 h/d,光照强度为1500 Lx条件下进行培养,饱满种子的出苗率高达99%。
2.离体培养与常规播种在乔纳金种子成苗率上存在明显差异。两种培养方式共获得690株乔纳金实生后代,其中离体培养获得的植株是481株,常规播种获得的植株是209株,很明显,离体培养获得的植株是常规播种获得的植株的2倍以上。通过试验共获得了13株多倍体资源,离体培养方式获得7株三倍体和4株四倍体,而常规播种只获得2株三倍体实生后代,离体培养可以获得较多的可贵资源。
3.三倍体实生后代中以非整倍体植株占多数,试验中共获得的非整倍体植452株,在染色体数目上均为40左右,没有出现大范围的分布。
4.多倍体植株在形态上表现明显的巨大性,即:叶片大而圆,叶形指数趋小化,叶片厚而粗糙,节问短,枝条粗壮,叶片气孔密度小,但气孔保卫细胞较大。多倍体的叶形指数一般在1.4,而非整倍体的叶形指数多大于2;多倍体的气孔密度明显低于二倍体和非整倍体,但保卫细胞大小却是非整倍体的2倍。这些特点可以作为多倍体育种的初选依据。
5.通过S-等位基因特异扩增,发现乔纳金实生后代中的三倍体株系存在着S-等位基因与母本完全相同的植株,部分鉴定出乔纳金实生后代中的三倍体来源于杂交。