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第一部分 不明原因复发性流产绒毛组织中miRNAs表达谱分析及靶基因预测目的筛选与不明原因复发性自然流产相关的差异性miRNAs,并进行靶基因预测其结合位点,为下一步研究提供理论依据。方法不明原因复发性流产和正常妊娠绒毛组织各3例行高通量测序检测miRNAs,筛选差异性倍数大的miRNAs进行生物信息学预测靶基因,琼脂糖凝胶电泳、RTqPCR产物验证测序结果。结果不明原因复发性流产与正常妊娠比较,以p<0.05,且基因上调或下调差异倍数大于2倍作为筛选标准,筛查出111个成熟型miRNAs,上调表达的miRNAs78个,下调表达的miRNAs33个,筛选差异性倍数大的miR-371a-5p生物信息学预测与靶基因XIAP存在结合位点,琼脂糖凝胶电泳、RT-qPCR产物验证与miR-371a-5p测序结果一致。结论miRNAs在不明原因复发性流产的存在差异性表达,miR-371a-5p与抗凋亡基因XIAP存在结合位点,miR-371a-5p调控XIAP可能是参与不明原因复发性流产的发生的机制之一。第二部分 差异性miR-371a-5p、XIAP在绒毛组织中的表达水平及特点目的扩大样本量检测不明原因复发性自然流产及正常妊娠绒毛组织中差异性miR-371a-5p、靶基因XIAP的表达特点。方法不明原因复发性自然流产与正常妊娠绒毛组织各30例采用RT-qPCR检测miR-371a-5p、XIAP的表达水平,并进行相关分析。结果两组绒毛组织之间miR-371a-5p、XIAP存在差异性低表达且呈正相关,具有显著差异性(P<0.05)。结论不明原因复发性自然流产和正常妊娠绒毛组织中miR-371a-5p与XIAP存在相关性,miR-371a-5p与凋亡相关基因XIAP表达异常与不明原因复发性流产的发生有关。第三部分 miR-371a-5pmimics和inhibitor转染至JEG-3细胞凋亡率检测目的为探讨miR-371a-5p对细胞凋亡的影响,miR-371a-5pmimics及inhibitor转染至JEG-3细胞了解细胞凋亡率。方法Lipofectamine2000转染miR-371a-5pmimics、miR-371a-5pinhibitor及对照至JEG-3细胞,48小时后采用流式细胞技术检测细胞凋亡率。结果miR-371a-5pmimics转染至JEG-3细胞48小时后细胞凋亡率增加,miR-371a-5pinhibitor转染至JEG-3细胞48小时后细胞凋亡率降低,存在显著差异性(P<0.05)。结论miR-371a-5p促进细胞凋亡的发生。第四部分 miR-371a-5p调节靶基因XIAP促凋亡的验证目的采用双荧光素酶验证miR-371a-5p与XIAP是否存在3’-UTR结合区域,通过XIAP/caspase-3信号通路触发凋亡级联反应促进细胞凋亡。方法采用双荧光素酶报告基因XIAP-miR-371a-wt、XIAP-miR-371a-Mut及miR-371A-5pmimics、inhibitor转染至JEG-3细胞,检测荧光素酶活性,转染48小时后RT-PCR检测miR-371a-5p、XIAP、caspase-3mRNA及Westernblotting检测XIAP、caspase-3蛋白表达水平。结果XIAP-miR-371a-5pwt活性检测存在显著差异性(P<0.05);XIAP-miR-371a-5pmut活性检测无显著差异性(P>0.05);转染前后miR-371a-5p、XIAP、caspase-3mRNA及XIAP、caspase-3蛋白表达水平存在显著差异性(P<0.05)。结论miR-371a-5p调控靶基因XIAP,触发XIAP/caspase-3信号通路的凋亡级联反应促进细胞凋亡,这些发现为miR-371a-5p调控XIAP表达,参与细胞凋亡的发生,为不明原因复发性流产发生提供新的有力的理论依据。