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本文为了增加该酶对青霉素G的催化能力，以两种来源的DAOCS基因(棒状链霉菌和产黄头孢)为模板进行error-pronePCR和DNAshuffling。将获得的1600多个可能含突变体扩环酶的克隆用Bioassay的方法检测，没有得到酶活显著提高的克隆，利用定点突变，对棒状链霉菌scDAOCS的C-末端的N304和R306位点进行了部分饱和突变，获得了N304L、N304K和R306L三种相对于野生型scDAOCS对青霉素G催化能力有较大幅度提高的突变体，在空间结构模拟分析的基础上，选择了产黄头孢acDAOC/DACS的C-末端的N305、R307和R308位点进行定点突变。其中N305和R307分别突变为N305L和R307L，R308位点则进行了饱和突变，并对野生型的acDAOC/DACS，N305L、R307L和R308L突变体进行了纯化和催化青霉素G活性的动力学参数的测定。