硼替佐米对食管癌放射敏感性的影响及其机制的研究

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目的硼替佐米是第一种人工合成的蛋白酶体抑制剂。食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一,我国的食管癌病人占全球一半以上。本课题研究硼替佐米对食管癌Eca-109、TE-1和KYSE细胞生长、周期和凋亡的影响,并进一步探讨硼替佐米对食管癌细胞的放射增敏作用。方法选取食管癌Eca-109、TE-1和KYSE细胞为研究对象。(1)利用四氮唑盐比色实验(MTT)测定不同浓度不同作用时间下硼替佐米对食管癌细胞增殖能力的影响;(2)流式细胞仪检测不同浓度硼替佐米作用24h后食管癌细胞周期的变化;(3)流式细胞仪检测不同浓度硼替佐米对食管癌细胞凋亡的影响;(4)Western blot法分析硼替佐米作用后食管癌细胞凋亡相关蛋白表达的变化情况;(5)细胞克隆形成法和MTT实验研究硼替佐米对食管癌细胞放射敏感性的影响。结果(1)硼替佐米能使三种食管癌细胞的生存率降低,并且呈剂量-时间依赖性;(2)硼替佐米处理三种食管癌细胞24h后可以使三种食管癌细胞发生G2/M期阻滞;(3)硼替佐米处理食管癌Eca-109、TE-1细胞24h后,两种细胞凋亡率均明显增加;而处理食管癌KYSE细胞24h后,细胞凋亡率增加不明显,延长作用时间至48h后,细胞凋亡率明显增加;(4)硼替佐米处理食管癌Eca-109、TE-1后,Caspase-3表达水平升高,NF-κB表达水平降低;(5)硼替佐米处理三种食管癌细胞24h后具有放射增敏效应,而48h后未能观察到放射增敏现象。结论(1)硼替佐米对三种食管癌细胞具有细胞毒性作用,呈时间-浓度依赖性;(2)硼替佐米能使三种食管癌细胞发生G2/M期阻滞;(3)硼替佐米能诱导三种食管癌细胞发生凋亡;(4)硼替佐米诱导细胞凋亡的能力可能与抑制NF-κB表达水平有关;(5)硼替佐米具有短期的放射增敏效应,但是长期作用不明显。
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