黄酮类化合物与牛血清白蛋白的相互作用研究

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自然界中存在的天然活性分子对治疗多种疾病都具有良好的疗效。血清白蛋白是生物体内最重要和最丰富的蛋白质,是存储和转运内源性物质和外源性物质的重要载体。因此,研究天然活性分子与血清白蛋白大分子的相互作用能够为药物代谢动力学、生物化学、制药学以及临床医学提供重要的生物和药学参数信息。本论文采用紫外-可见光谱和荧光光谱为研究手段,研究了几种黄酮类化合物与牛血清白蛋白的相互作用。主要包括以下两个方面内容:一、综述了天然活性分子与大分子相互作用的研究现状及意义;二、在模拟人体生理条件(pH=7.4)下研究几种黄酮类分子与血清白蛋白的相互作用。通过研究几种结构类似黄酮类化合物与BSA的相互作用,探讨黄酮类化合物与BSA相互作用的有效位点。实验结果表明:黄酮类化合物的3位和6位都是与BSA相互作用的有效位点,且不同位点上不同基团对BSA的作用影响也不同,基团上羟基数目将影响到活性分子与BSA的作用方式和作用强度。此外,研究了稀土金属配合物与BSA相互作用研究。第一章:首先简单介绍了蛋白质的结构特征和功能性质,重点阐述了活性小分子与蛋白质相互作用的研究内容和研究方法,以及存在的问题及其小分子与大分子相互作用研究展望。第二章:用紫外-可见光谱法和荧光光谱法研究了两种从天然活性分子瑞香黄烷A (DPA)和瑞香黄烷B (DPB)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。初步探讨了DPA和DPB对BSA的猝灭机理,并得到他们间的猝灭方式为静态猝灭。用荧光猝灭法测定了DPA和DPB与BSA相互作用的结合常数K和结合位点n。根据三个温度下的热力学常数确定了DPA和DPB与BSA之间的以及热力学常数(ΔG、ΔH、ΔS)以及作用类型。通过紫外吸收光谱和荧光光谱的重叠光谱得到分子间的结合空间距离。并考察了6种金属离子存在下对体系作用的影响。通过DPA和DPB与BSA相互作用的研究,推测出黄烷类化合物结构的3位是小分子与BSA相互作用的有效位点。第三章:用光谱法研究了异鼠李素4种不同的葡萄糖苷与BSA的相互作用。测得四种活性小分子对BSA的猝灭机理均为静态猝灭,并通过荧光光谱法得到了分子间的结合常数以及结合位点。根据不同温度下的热力学常数确定四种化合物与BSA的作用方式。根据Forster能量转移理论求得小分子与BSA结合时能量供能体-受体的结合距离。实验结果表明:在4种葡萄糖苷中3位上取代基含羟基数目越多,其与BSA的结合常数越大。第四章:用荧光光谱法研究了刺槐素(ACA)和柳穿鱼黄素(PEC)两种小分子与BSA的相互作用研究。实验结果表明:两种小分子对BSA的猝灭方式均为静态猝灭,结合方式为氢键或范德华力,不同金属离子对小分子-蛋白质体系的结合都有影响。推测黄酮类化合物上6位也是小分子与BSA作用的有效位点。第五章:采用荧光光谱法研究了根皮素稀士金属配合物及根皮素异烟酰基腙稀士金属配合物与BSA的相互作用。实验结果表明:根皮素稀土金属配合物与BSA的相互作用比根皮素异烟酰基腙稀土金属配合物与BSA的相互作用的结合常数要大一个数量级左右。
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