目的:为探索高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的防控技术,对贵州省高致病性PRRS的临床诊断特征,病原学鉴定、变异毒株与经典毒株的区别、病毒的分子流行病学、媒介动物的传播意义及疫苗免疫程序展开全面研究。方法:通过流行病学调查,了解贵州省PRRS发病猪品种,临床特征、季节性流行特征和地域分布;对PRRSV贵州流行毒株进行分离,通过比较PRRSV不同基因的RT-PCR扩增效果,筛选适于RT-PCR临床诊断的目的基因;基于12株PRRSV贵州流行毒株的Nsp2基因和10株PRRSV贵州流行毒株的GP5基因,开展分子流行病学研究;通过从三带喙库蚊、家蝇和家鼠检测PRRSV核酸,调查PRRSV隐蔽携带者,评估媒介动物在PRRS传播中的意义;根据PRRSV贵州流行毒株的遗传变异特征,选择适于贵州省使用的PRRSV疫苗种类,通过母源抗体和免疫抗体的消长规律检测,制定合理的免疫程序。结果:贵州省8个地区43个猪场中,37个猪场暴发高致病性PRRS。6～8月份为发病高峰,PRRS的发病与猪群遗传背景无明显关系,病猪普遍表现皮肤微循环障碍和体温升高(39.7℃～41.7℃),死亡猪以29d～99d为主(62.3%),病猪普遍发生肺和肺门淋巴结出血,表现间质性肺炎;与猪瘟病毒混合感染达24.32%;发病猪群的血清抗体水平明显高于临床健康非免疫猪群,而低于临床健康免疫猪群。通过Marc-145细胞增殖病毒,成功分离到11株PRRSV,在进行比较的4个基因中,N基因检测所需的核酸量最少,扩增效果最佳,适于含毒量较少样本的检测,Nsp2基因扩增可对高致病性毒株和经典毒株进行鉴别。共有3种Nsp2基因不同程度缺失类型的PRRSV同时在贵州省流行,66.67%的毒株缺失90个核苷酸,25%的毒株缺失177个核苷酸,8.33%的毒株缺失93个核苷酸,流行毒株的GP5基因均发生了点突变,表现了高致病性PRRSV的变异特征。贵州流行毒株间基于Nsp2基因的遗传距离为0.001～0.027,基于GP5基因的遗传距离为0.000～0.007,在系统发生树上聚为2大类,同是美洲型毒株;贵州流行株与参考毒株之间基于Nsp2基因的遗传距离为0.008～0.268,相似度为77.7%～99.2%,基于GP5基因的遗传距离为0.010～0.122,相似度为88.9%～99%,PRRSV贵州流行毒株与国内近年流行的毒株系统发生关系接近,与早期流行毒株距离较远,毒株间的差异与地域间的距离没有明显相关性,毒株在Nsp2和GP5基因水平上的进化趋势一致,但Nsp2基因更不稳定。三带喙库蚊可携带具有感染性的高致病性PRRSV 24h以上,具有传播PRRSV的重要意义,家蝇能在体表短期携带PRRSV(低于12h),家鼠和小白鼠不能检测到PRRSV。NVDC-JX-A1株灭活疫苗是当前最适于贵州省预防PRRS的疫苗,PRRS首免应在20d左右,50～60d时应加强免疫,母猪在配种前应进行免疫。结论:贵州省PRRS具有明显的发病特征,N基因最适于PRRS病原核酸的检出,Nsp2基因扩增可鉴别高致病性PRRSV和经典PRRSV,贵州省流行的PRRSV均为具有高致病性PRRSV变异特征的美洲型毒株,研究在贵州省新发现2种Nsp2基因缺失类型的流行毒株,三带喙库蚊具有传播PRRS的重要意义,家蝇和鼠类是否能够传播PRRS尚待研究,制定的疫苗接种程序等综合防控技术在全省52家猪场推广,取得了较理想的效果。