【摘 要】
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体外扩增脐血造血干细胞(HSC)以满足成人移植需要已成为国际研究的热点.该文分别从细胞因子组合、自体血浆和转瓶悬浮培养三方面考察了脐血CD34富集细胞体外培养特性.该文研
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体外扩增脐血造血干细胞(HSC)以满足成人移植需要已成为国际研究的热点.该文分别从细胞因子组合、自体血浆和转瓶悬浮培养三方面考察了脐血CD34<+>富集细胞体外培养特性.该文研究结果表明,在孔板内采用细胞因子组合FL+TPO+SCF+IL-6培养CD34<+>富集细胞可以实现总细胞和造血干/祖细胞的大量扩增.FL、TPO和IL-6在培养的早期加入对集落的形成和CD34<+>细胞的扩增有促进作用.自体血浆可代替血清培养CD34<+>富集细胞,比较血清和血浆培养结果发现,血清培养可以得到较高的总细胞以及CD34<+>细胞的扩增.5％的自体血浆浓度对CD34<+>富集细胞的生长也有较好的作用,经过3周的短期培养,5％自体血浆培养可以支持较高的集落形成能力并得到较高的集落密度.通过静态培养和动态培养比较实验发现,转瓶培养中接种密度很重要,接种密度过高不利于总细胞的扩增、集落的形成以及CD34<+>细胞扩增;而接种密度过低则造成细胞早期大量死亡.CD34<+>富集细胞在孔板内生长较旺盛,其总细胞以及集落扩增都要高于转瓶培养.但在培养后期,孔板培养的细胞CFU-GM扩增倍数快速下降而转瓶内细胞仍保持稳定.孔板内培养的CD34<+>细胞含量,生长后期低于转瓶,转瓶培养的细胞仍然有少量扩增.以上结果说明转瓶悬浮培养对CD34<+>细胞有很好的维持作用.
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