猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是一种重要的人畜共患病病原，根据菌体荚膜多糖抗原性的不同，分为35个血清型(1-34型，1/2型)。世界范围内以SS2(Streptococcus suis type 2)流行最广，致病性最强，其次是1型、7型和9型。尤其是猪链球菌2型流行范围最广，对猪的致病性最强，而且可引起人的感染并致死。除SS2外，SS9主要在德国、比利时、西班牙、荷兰等地流行；芬兰以SS7最为流行。国内1991年在广东省首次分离鉴定到SS2，随后于1998年和2005年分别在江苏和四川部分地区暴发人感染SS2并致人死亡，危害严重。不同血清型的地区分布不同。上海地区是全国大规模猪养殖场较多的地区，是生猪输出、输入较大的城市，因此及时掌握上海地区致病性猪链球菌及其毒力因子的流行病学，为以后预防和控制大规模暴发猪链球菌具有重要的意义。2005年-2007年期间，以上海市畜牧兽医站日常猪病门诊为基础，部分规模化养殖场鼻拭子采样为辅，对上海地区主要致病性猪链球菌及其毒力因子进行流行病学调查。首先对采的样品中进行链球菌分离，根据培养特性及形态、染色情况，分离鉴定了306株猪源链球菌，并对其进行药敏实验。根据猪链球菌16SrRNA和gdh(谷氨酸脱氢酶)基因设计合成引物，建立的二重PCR,结合乳胶凝集试验对所分离的306猪源链球菌进行猪链球菌和链球菌A-G群鉴定，并对鉴定出的猪链球菌进行生化实验．鉴定结果表明：门诊分离的214株中，C群链球菌为主要致病菌(87株，占40．7％)，猪链球菌次之(28株，占13．1％)，A群链球菌有4株，占1．9％；B群链球菌有16株，占7．4％；D群链球菌有18株，占8．4％；E群链球菌有14株，占6．5％；另外未能定型有47株，占22％。猪场鼻拭子分离的92株中，猪链球菌4株，占4．4％；D群链球菌有52株，占56．5％；另外未能定型有36株，占39．1％。然后根据猪链球菌6种主要致病性血清型(1型、1/2型、2型、7型、9型和14型)菌株荚膜多糖的编码基因CPS1I，CPS2J，CPS7H，CPS9H的核酸序列的设计合清型分型。检测结果表明：8株SS2(8/32)、3株SS1(3/32)、2株SS7(2/32)、2株SS9(2/32)，17株SS其它血清型。对SS1、SS2、SS7、SS9共15株菌株进行泱序，测序结果与检测结果符合率达100％，与GenBank发表的序列的同源性均在990％以上。根据猪链球菌7种主要毒力基因谷氨酸脱氢酶(gdh)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gapdh)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(epf)，溶血素(sly)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fpbs)和毒力相关基因orf2，设计并合成7对引物，通过组合优化设计，建立猪链球菌7种主要毒力因子的两组多重PcR检测方法，并对分离到的32株猪链球菌和12株实验室猪链球菌保存菌株进行毒力基因检测。结果表明：SS2大部分均具有7种毒力因子，SS1、SS7、SS9和其他血清型的猪链球菌也均具有部分毒力因子。32株猪链球菌中，mrp检出率为25％(8/32)、epf检出率为21．9％(7/32)，sly检出率为25％(8/32)、gdh检出率为100％(32/32)，gapdh检出率为100％(32/32)，orf2检出率为78．3％(25/32)、fbps检出率为25％(8/32)。15株上海分离株毒力因子的测序结果与GenBank发表的序列的同源性均在95％以上，12株实验室保存菌株毒力因子的检测结果与已知的背景材料一致。为进一步研究所分离到的4种主要致病性血清型菌株致病力，探讨毒力基因和菌株致病力之间的关系，本实验建立了斑马鱼(Danio rerio)和新西兰白兔动物实验模型，实验结果表明：猪链球菌4种主要致病性血清型中，SS2对斑马鱼和新西兰白兔均具有致病力，而SS1、SS7，SS9三种血清型对斑马鱼和新西兰白兔致病力弱。因此上海地区分离的SS2菌株，不仅对猪有强致病性，对斑马鱼和新西兰白兔也具有致病性，而SS1、SS7、SS9这3种血清型菌株对新西兰白兔和斑马鱼致病性较弱，这一定程度上表明，致病性菌株毒力的强弱和菌株具有的毒力基因具有相关性。